|
|
IX. Иммунологические механизмы клеточного гомеостаза
Предыдущая: Генетическое постоянство соматических клеток
и уровень соматических мутаций
Иммунная система: стволовые клетки, Т- и В-лимфоциты
На рис. 58 представлена современная схема иммунопоэза (по докладу научной группы ВОЗ, 1977). Существование клеток, показанных
на схеме, нашло всеобщее признание. Надо сказать, что существование лимфоидных стволовых клеток (LSC), возникающих из кроветворных
стволовых клеток, обосновано совсем недавно. LSC генерируют два типа клеток: РТС - предшественники Т-клеток и РВС - предшественники
В-клеток, из которых и развиваются популяции двух типов. Помимо Т-помощников, обеспечивающих совместно с макрофагами включение
В-лимфоцитов в дифференцировку с накоплением антителопродуцентов, открыты Т-супрессоры. Последние блокируют включающее действие
помощников, тормозят антителогенез, обеспечивают становление иммунологической толерантности. Гиперфункция супрессоров приводит
к развитию гипогаммаглобулинемии; недостаточность по супрессорам влечет за собой аутоиммунные расстройства.
Большинство регистрируемых функций клеток иммунной системы осуществляется, по-видимому, через гуморальные факторы. Гомеостаз
на уровне иммунной системы поддерживается сложными процессами клеточных взаимодействий и миграций.
Стволовые клетки костного мозга являются своего рода "семенным материалом" для всех лимфоидных тканей, поэтому костный мозг можно
считать одним из центральных органов иммунной системы.
Стволовые клетки морфологически но идентифицированы. Тем не менее разработан прием их количественного учета в костном мозге и
других кроветворных органах у мышей (Till J. Е., McCulloch Е. А., 1961). При введении летально облученным реципиентам клеток
кроветворной ткани было обнаружено образование в селезенке дискретных колоний на 8-10-й день после переноса. С использованием
костного мозга от облученных мышеи, содержащего определенный тип хромосомных аберраций, цитогенетическим анализом клеток колоний
было доказано, что каждая колония в селезенке представляет собой клон, возникший из одной клетки-предшественницы. В дальнейших
исследованиях было выявлено, что каждая колония состоит из нескольких миллионов незрелых клеток эритроидного, миелоидного или
мегакариоцитарного ростка (Lewis J. P., Trobaugh F. Е., 1964). На основании функциональных признаков колониеобразующих единиц (КОЕ)
и их способности к самоподдержанию их считают стволовыми клетками. Следует подчеркнуть, что одни и те же хромосомные аберрации
обнаруживаются в КОЕ, Т-, В-лимфоцитах и других клетках крови (Phillips R. A. et al., 1977). Эти данные окончательно доказали
полипотентность КОЕ. Концентрация стволовых клеток в костном мозге равна 10-4, в селезенке 10-5, в
периферической крови 10-6 в расчете на ядросодержащие клетки.
В организме позвоночных кроветворная ткань располагается отдельными очагами (в костях скелета и селезенке), связь между
которыми поддерживается через систему кровообращения. Кроветворная система четко реагирует как единый орган при локальных
поражениях или при экстремальных состояниях, вызывающих повышенный запрос в кроветворении. Какие механизмы участвуют в интеграции
кроветворной системы? Оказалось, что функционирование кроветворной ткани как физиологически единой системы осуществляется в
значительной степени благодаря способности стволовых клеток к рециркуляции и обмену между различными участками кроветворной
системы.
Первое четкое доказательство способности кроветворных стволовых клеток к миграции пришло из экспериментов, которые показали,
что в периферической крови содержатся клетки, обладающие функцией стволовых и способные образовывать кроветворные колонии.
Посредством специальных экспериментальных приемов, в основе которых лежит количественный учет КОЕ, выбрасываемых в кровоток,
удалось рассчитать интенсивность циркуляции и перераспределения стволовых элементов между кроветворными тканями. В экспериментах
Р.В. Петрова и Р.М. Хаитова (1972) мышей облучали с экранированием участка костного мозга и методом экзогенного клонирования
КОЕ определяли репопуляцию стволовых клеток в облученные ткани и в кровь. Полученные данные свидетельствуют о том, что быстрая
репопуляция гемопоэтических тканей у облученных (при экранировании участка костного мозга) мышей связана с выходом в кровоток
стволовых клеток, которые циркулируют в организме, заселяя облученные ткани. В последующих опытах была сделана попытка ответить на
вопрос, осуществляется ли восстановление именно благодаря миграции стволовых клеток или ведущее значение имеет гуморальная
стимуляция из необлученных участков. Для решения этого вопроса осуществили парабиотическое соединение (целиарный анастомоз) мышей
сингенных линий СВА/Н и СВА/Н-Т6Т6, клетки которых различимы по хромосомным маркерам. До операции одного партнера облучали тотально,
а второму при этом экранировали задние конечности.
Хромосомный анализ клеток колоний в селезенке тотально облученного парабионта показал, что все колонии образовались из стволовых
клеток, мигрировавших из экранированного костного мозга. Уверенность в этом послужила отправным моментом для количественной оценки
интенсивности миграции стволовых клеток из экранированного участка костною мозга (Петров Р. В., Хаитов Р. М., 1972). Мышам во время
облучения в дозе 800 Р экранировали правую заднюю конечность. Затем через разные интервалы времени локально облучали в той же дозе
экранированные участки. Спустя 8 сут после второй экспоцизии извлекали селезенки и подсчитывали количество колоний. Оказалось,
что увеличение числа колоний в селезенке есть функция времени между облучениями, функция числа мигрирующих за это время стволовых
клеток. Подсчитано, что в течение суток из костного мозга одной конечности мыши мигрирует почти 100 КОЕ (1,4% из расчета на все
КОЕ экранированного костного мозга).
Таким образом, полученные результаты демонстрируют активную рециркуляцию стволовых клеток. Эти данные согласуются с результатами
опытов Хенкса (Hanks G. Е., 1964), который наблюдал линейный выход из экранированного при облучении костного мозга. Эксперименты
(Петров Р. В., Хаитов Р. М., 1972), в которых миграция КОЕ прослежена в течение суток, демонстрируют, что темп выселения КОЕ из
экранированного костного мозга голени не снижается по крайней мере в течение 24 ч после облучения.
Таблица 22. Миграция стволовых клеток из экранированного при облучении (800 Р) костного мозга
у адреналэктомированных и контрольных мышей |
Экранированный участок задней конечности |
Животные |
Сутки после операции |
Число колоний в селезенке |
До коленного сустава |
Интактные | - | 19,5 ± 1,2 | (18) |
ЛО | 2 | 18,9 ± 2,1 | (14) |
АЭ | 2 | > 30 | (16) |
АЭ | 7 | > 30 | (8) |
Интактные | - | 6,3 ± 0,6 | (23) |
ЛО | 2 | 7,0 ± 0,8 | (20) |
АЭ | 2 | 21,5 | (2) |
До 1/2 голени | | | > 30 | (5) |
ЛО | 7 | 7,4 ± 1,3 | (15) |
АЭ | 7 | 25,4 ± 2,4 | (5) |
| | > 30 | (12) |
Стопа |
Интактные | - | 3,5 ± 0,8 | (12) |
АЭ | 2 | 26 | (1) |
| | > 30 | (2) |
Примечание. В скобках - число мышей; ЛО - ложная операция; АЭ - адренал- эктомированные животные; > 30 - сливной рост колоний. |
Рециркуляция стволовых клеток через кровь является важным процессом, обеспечивающим интеграцию в миелолимфоидной системе.
Однако механизмы, регулирующие миграцию стволовых клеток, не были исследованы. В последние годы коллективом исследователей
(Р.В. Петров, Р.М. Хаитов, Б.Б. Мороз, Г.И. Безин и др.) были получены экспериментальные материалы, свидетельствующие об участии
кортикостероидных гормонов в регуляции миграции и рециркуляции стволовых клеток. Р.М. Хаитов и соавт. (1974), R.М. Khaitov и соавт.
(1975) исследовали влияние гипокортикоидного состояния, вызываемого адреналэктомией, на миграцию стволовых клеток. В табл. 22
представлены результаты экспериментов по изучению влияния двусторонней адреналэктомии на миграцию кроветворных стволовых клеток
из костного мозга. Ложная операция не влияет на интенсивность расселения стволовых клеток из экранированного участка костного
мозга. Адреналэктомия, проведенная за 2-7 сут до исследования, приводит к резкому усилению миграции стволовых клеток из костного
мозга, при этом эффект усиления миграции стволовых клеток у адреналэктомированных мышей не зависит от объема экранированного
костного мозга - источника расселяющихся стволовых клеток. Более чем четырехкратное увеличение выхода стволовых клеток получено
у адреналэктомированных мышей, которым экраниравили заднюю конечность до уровня 1/2 голени или только стопу (см. табл. 22).
Таким образом, выключение функции надпочечников сопровождается резким усилением выброса в циркуляцию стволовых клеток из
костного мозга. Увеличение числа эндогенных колоний в селезенке летально облученных животных при экранировании участка костного
мозга под влиянием тех или иных факторов может происходить или в результате усиления непосредственно миграции стволовых клеток из
костного мозга, или же за счет стимуляции размножения репопулирующих в селезенку стволовых клеток, или вследствие местных изменений
в селезенке, способствующих лучшему оседанию в ней стволовых клеток.
Для проверки этих предположений был проведен эксперимент с введением экзогенных стволовых клеток адреналэктомированным
реципиентам. Через 7 сут после адреналэктомии мышей облучали γ-лучами в летальной дозе (850 Р) и трансплантировали им клетки
костного мозга от интактных сингенных доноров. Адреналэктомия не влияла на репопуляцию селезенки экзогенными стволовыми клетками
и не приводила к стимуляции их размножения. В периферической крови интактных мышей обнаруживается 6,6-9,7 стволовой клетки в расчете
на 106 лейкоцитов, или 24,6-30,3 стволовой клетки в 1 мл. У адреналэктомированных мышей наблюдается более чем двухкратное
увеличение количества циркулирующих стволовых клеток в расчете как на 106 лейкоцитов, так и на 1 мл крови на все сроки
исследования, т. е. происходит повышенное выселение кроветворных стволовых клеток из костного мозга. В связи с этим возник вопрос,
изменяются ли процессы рециркуляции стволовых клеток при повышенных концентрациях эндогенных кортикоидов.
Г.И. Безин и соавт. (1975) исследовали миграцию стволовых клеток в условиях гиперкортицизма, вызванного введением АКТГ.
Различную степень гиперкортикоидного состояния индуцировали повторными подкожными инъекциями АКТГ пролонгированного действия в
разных дозах. Уже через 2 ч после облучения в дозе 800 Р и инъекций АКТГ содержание 11-оксикортикостероидов (11-ОКС) в плазме
повышалось до 82,9 мкг%, т. е. в 10 раз (нормальный уровень 11-ОКС у интактных мышей равен 8,3 мкг%), оставаясь примерно на этом
же уровне в течение последующих 6 ч. Через 24 ч после облучения и введения АКТГ (к моменту повторной инъекции препарата в дозе
1,5 ед.) концентрация 11-ОКС была ниже нормального уровня. После второго введения АКТГ наблюдалась аналогичная динамика изменения
уровня 11-ОКС, но степень увеличения концентрации кортикоидов была примерно в 2-2,5 раза меньше, чем после первой инъекции гормона.
У облученных контрольных животных через 2 ч после облучения уровень 11-ОКС повышался до 30 мкг%, через 5 ч и в последующие сроки
наблюдения величина этого показателя оставалась на субнормальном уровне.
Таблица 23. Уровень миграции стволовых клеток из костного мозга в условиях гиперкортицизма (число
эндогенных колоний в селезенке) |
850 Р + экран до 1/2 голени |
850 Р тотально (контроль облучения) |
+ изотонический раствор хлорида натрия 0,5 мл (контроль экранирования) |
+ АКТГ |
доза АКТГ, ед. |
2 инъекции сразу и через 24 ч после облучения |
1 инъекция сразу после облучения |
25,9 ± 1,3 (20) | 1,5 | 12,6 ± 0,7 (28) | 13,2 ± 1,2 (18) | 0,7 ± 0,1 (10) |
22,6 ± 1,9 (18) | 1,0 | 10,3 ± 0,9 (17) | 9,7 ± 1,1 (16) | 1,1 ± 0,3 (13) |
Примечание. В скобках - число животных. |
Оказалось, что на фоне гиперкортицизма происходит значительное торможение миграции стволовых клеток (табл. 23). Однократное
введение АКТ (1,5 ед.) сразу после облучения вызывает практически такое же угнетение миграции стволовых клеток, как и при двух
инъекциях в той же дозе. Следовательно, повышение активности коры подпочечников, сопровождающееся резким увеличением содержания
кортикостероидов в крови, приводит к ингибированию миграции кроветворных стволовых клеток. Однако уменьшение количества колоний в
селезенке мышей, которым ввели АКТГ, может быть следствием не только угнетения процесса миграции, но и цитостатического действия
высоких концентраций эндогенных глюкокортикоидов.
В связи с высказанным предположением было изучено влияние АКТГ на эндогенное колониеобразование в селезенке сублетально облученных
животных (Безин Г. И. и др., 1975). Мышей облучали в дозе 600 P и двукратно вводили им АКТГ в дозе 1,5 ед. на мышь. Введение АКТГ
сублетально облученным мышам не угнетало размножения эндогенных стволовых клеток. Отсутствие цитотоксического действия использованных
доз АКТГ окончательно доказано в опытах с экзогенным клонированием стволовых клеток. Клетки костного мозга вводили летально облученным
реципиентам через 2 ч после введения АКТГ (1,5 ед. на мышь), т. е. на фоне высоких концентраций кортикоидов в плазме крови. Через
20 ч после трансплантации костного мозга производили вторую инъекцию АКТГ в той же дозе. Количество экзогенных колоний в селезенке
реципиентов, обработанных АКТГ, не изменялось.
В последующей работе была выявлена зависимость между уровнем кортикоидов в плазме и количеством стволовых клеток, циркулирующих
в периферической крови. При изучении динамики циркуляции КОЕ в периферической крови интактных (необлученных) животных после
однократного подкожного введения АКТГ пролонгированного действия в дозе 1,5 ед. на мышь установлено, что через 2-8 ч после введения
АКТГ значительно повышался уровень 11-ОКС в плазме крови. В эти же сроки резко уменьшалось количество циркулирующих КОЕ. Через
24 ч после инъекции АКТГ при субнормальном уровне 11-ОКС содержание КОЕ в крови возвращалось к исходной величине.
Изложенные выше материалы были получены в условиях высоких концентраций эндогенных кортикоидов, создаваемых введением АКТГ
пролонгированного действия. В то же время, как хорошо известно, кратковременная активация коры надпочечников закономерно возникает
при действии на организм различных стресс-факторов. Возник вопрос, влияет ли такая реакция на процессы рециркуляции КОЕ? В этой
связи исследовали динамику циркуляции КОЕ и концентрации 11-ОКС в плазме крови интактных (необлученных) животных после внутрибрюшшшого
введения АКТГ в дозе 1,6 ед. на мышь (АКТГ острого действия). Через 30 мин, 1 и 2 ч после инъекции АКТГ наблюдалось повышение
уровня кортикоидов в плазме крови и уменьшение количества циркулирующих КОЕ. Через 4 ч, когда концентрация гормона возвращалась к
исходным величинам, восстанавливалось до нормы и содержание КОЕ в периферической крови (Moroz В.В. et al., 1975). В следующей серии
экспериментов исследовали влияние разных доз АКТГ (0,05-1,6 ед. на мышь) на уровень циркулирующих КОЕ через 30 мин после инъекции
гормона. Достоверное снижение содержания КОЕ в циркулирующей крови наблюдалось, когда концентрация 11-ОКС в плазме крови составляла
35,8±2,2 мкг% при средних значениях в норме 14,4±1,6 мкг%. При этом количество КОЕ составляло 60% исходной величины.
Следовательно, увеличение содержания эндогенных кортикоидов в крови, сопоставимое по величине и длительности с таковыми при обычной
стресс-реакции (опыты с АКТГ острого действия), сопровождается закономерным уменьшением количества циркулирующих стволовых клеток.
Таким образом, стимуляция функции коры надпочечников приводит к торможению миграции стволовых клеток из костного мозга. Действие
АКТГ на миграцию стволовых клеток опосредуется через повышение концентрации в крови эндогенных глюкокортикоидов, так как аналогичные
результаты получены при введении экзогенного гидрокортизона (Петров Р. В. и др., 1975).
Хорошо известно наличие суточной периодичности поступления в кровь гормонов коры надпочечников у грызунов (мышей и крыс) с
максимумом секреции в вечерние и минимум в утренние часы. Оказалось, что концентрация циркулирующих стволовых клеток также подвержена
циклическим (суточному ритму) изменениям. В крови концентрация стволовых клеток в несколько раз больше утром, чем после полудня.
Следовательно, суточный ритм поступления в циркуляцию стволовых клеток находится в обратной зависимости от суточной периодичности
выброса в кровь кортикостероидов. Интересно, что у мышей линий СВА и C57BL, оппозитных по уровню кортикостерона в плазме крови,
отмечается обратная корреляция между интенсивностью миграции стволовых клеток и количеством их в норме в периферической крови, с
одной стороны, и концентрацией 11-ОКС в крови - с другой. Эти факты также свидетельствуют о тесной связи между уровнем
кортикостероидов в крови и интенсивностью рециркуляции стволовых клеток.
Суммируя данные об эффектах гипо- и гиперкортицизма, можно сделать заключение, что процессы миграции и рециркуляции КОЕ в
организме находятся под гормональным контролем и зависят от глюкокортикоидной функции надпочечников. По-видимому, физиологические
концентрации глюкокортикоидов оказывают сдерживающее влияние на миграцию КОЕ. Уменьшение содержания циркулирующих КОЕ возникает лишь
при определенной степени повышения концентрации кортикоидов в плазме крови. Это вполне сопоставимо по размерам с подъемом уровня
кортикоидов, который наблюдается после достаточно интенсивного воздействия на организм различных стресс-агентов.
Взаимодействие Т- и В-клеток, инициирующее иммунный ответ
В конце 60-х годов было установлено, что в выработке антител принимают участие клетки как кроветворной, так и лимфоидной системы
(Claman Н. N. et al., 1966). Наиболее четко подобные доказательства представлены J. F. А. P. Miller, G. F. Mitchel (1968),
G. J. V. Nossal и соавт. (1968). У мышей неонатальная тимэктомия снижает иммунный ответ против гетерологичных антигенов.
Иммунореактивность тимэктомированных мышей легко восстанавливается при введении тимоцитов или лимфоцитов грудного протока, но не
клеток костного мозга, причем иммунный ответ к эритроцитам барана у тимэктомированных мышей по своей величине приближается к ответу
интактных мышей и не зависит от того, вводятся ли сингенные или полусингенные клетки вилочковой железы. Последнее обстоятельство
позволило провести с помощью изоантисывороток анализ происхождения АОК. Оказалось, что почти все антителопродуценты происходят из
клеток костного мозга. При введении летально облученным реципиентам смеси клеток костного мозга и вилочковой железы (или грудного
протока) с эритроцитами барана, которые сами по себе в отдельности неактивны в выработке антител, происходит синергическое накопление
АОК в селезенках реципиентов. Следует отметить, что в этом случае взаимодействие клеток костного мозга и вилочковой железы
реализовалось при условии сингении клеток. Анализ с применением хромосомного маркера Т6Т6 окончательно доказал, что основная масса
АОК происходит из предшественников костного мозга. Кооперирующие клетки костного мозга и вилочковой железы впоследствии получили
название В-и Т-клеток соответственно.
При индукции реакции "трансплантат против хозяина" родительскими клетками у новорожденных гибридов F1 синергический
эффект наблюдается между клетками вилочковой железы и лимфатических узлов, а также (хотя и менее слабый) тимуса и селезенки
(Cantor Н., Asofsky R., 1970). Предполагается, что в реакциях клеточного иммунитета взаимодействие происходит не между В- и
Т-клетками, а между самими Т-клетками. Отсюда делается вывод, что среди Т-клеток следует различать T1- и
Т1-клетки, из которых первые накапливаются преимущественно в селезенке и неспособны к циркуляции, а вторые - в
лимфатических узлах и активно рециркулируют. Считается, что T1-клетки являются короткоживущими лимфоцитами, а
Т2-клетки - долгоживущими.
Более прямое доказательство существования T1- и Т2-клеток получено из дальнейших работ Н. Cantor.
Обработка клеток лимфатических узлов слабыми концентрациями анти-Θ-сыворотки (в разведении 1:16) полностью отменяла их
способность индуцировать реакцию "трансплантат против хозяина". Однако, если эти обработанные клетки лимфатических узлов смешивали
с нормальными клетками вилочковой железы и смесь вводили новорожденным гибридам F1, отмечался такой же синергический
эффект в индукции реакции "трансплантат против хозяина", как и при использовании смеси нормальных клеток лимфатических узлов и
тимуса.
- Роль макрофагов во взаимодействии Т- и В-клеток
[показать]
Опыты in vitro показали, что при непосредственном смешивании популяций В- и Т-клеток иммунного ответа не
возникает. Для реализации иммунной реакции требуется добавление третьего компонента - селезеночных клеток, облученных в
высокой дозе. Как выяснилось в дальнейшем, по морфологической характеристике эти радиорезистентные клетки оказались
макрофагами. По-видимому, макрофаг переносит клеткам-продуцентам антител и (или) клеткам-помощникам переработанный антиген в
высокоиммуногенной форме.
Возможно, что функция макрофагов в инициировании синтеза антител заключается в том, что они концентрируют антиген и таким
образом представляют собой место, где встречаются В- и Т-клетки. Взаимодействие макрофагов и лимфоцитов в клеточном иммунитете
находится под контролем генов, картированных в субобласти IA комплекса Н-2 (Beller D. I. et al., 1978).
- Механизмы кооперации Т- и В-клеток
[показать]
Установлено, что гены, контролирующие взаимодействие Т- и В-клеток (гены-CI), локализованы в области I
комплекса Н-2 (Katz D. Н., 1976). Т-Т-кооперация контролируется генами субобластей IA и IJ, взаимодействие Т-клеток,
макрофагов и В-клеток - генами субобласти IA. Гены, контролирующие проявление вспомогательной функции Т-клеток, картированы
в К-конце комплекса Н-2, в субобласти IA. По-видимому, антителогенез к тимусзависимым антигенам включается при совместном
действии генов-CI и Ir (Ir - от англ. Immune response - иммунный ответ), продукты которых проявляются на лимфоцитах и
макрофагах в виде биомолекулярного комплекса Ir - CI.
Механизмы кооперации Т- и В-клеток в иммунном ответе интенсивно обсуждаются. Хорошо известно, что активированные антигеном
Т-лимфоциты продуцируют медиаторы, замещающие их вспомогательную функцию. Предполагают, что один из них является антигенспецифическим
фактором, который в комплексе с концентрированными детерминантами антигена стимулирует В-клетки. Подтверждением этого служит
существование ряда тимуснезависимых антигенов. Они являются естественными полимерами, характеризующимися регулярностью структуры и
относительной однородностью антигенных детерминант, что, по-видимому, позволяет им реагировать непосредственно с рецепторами
В-лимфоцитов, минуя этап модификации антигена специфическими рецепторами на поверхности Т-лимфоцитов и макрофагов. Бозможно
поэтому иммунный ответ на такие антигены развивается без вспомогательного участия Т-клеток. Более того, Т-клетки интактвых животных
угнетают антителогенез на эти антигены. Вспомогательная функция Т-лимфоцитов осуществляется с помощью специфических и неспецифических
гуморальных факторов. Неспецифические факторы вырабатываются под влиянием различных антигенов или митогеыов. Для продукции
неспецифических факторов при антигенной стимуляции необходимо присутствие макрофагов. Усиление антителогенеза под влиянием
неспецифического фактора не контролируется генетически, т. е. реализуется при наличии барьера гистосовместимости. При изучении
химической природы неспецифических медиаторов Т-клеток установлено, что они термостабильны, устойчивы к обработке ДНК-азой и
РНК-азой, но инактивируются протеазами. Молекулярная масса их составляет 30 000-60 000.
Способность Т-помощников продуцировать специфический фактор (или факторы) была показана М. Feldmann и соавт. (1975). Они
установили, что синтез В-клетками антител к гаптену, конъюгированному с носителем, индуцируется фактором, который вырабатывается
Т-клетками, активированными тем же носителем. По-видимому, специфический фактор образует комплекс с антигеном и, концентрируя его
на поверхности макрофагов, доводит до иммуногенной формы. В отличие от специфического фактора неспецифический действует
непосредственно на В-лимфоциты без участия макрофагов. По мнению М. Feldmann и соавт. (1975), специфический фактор Т-клеток обладает
специфической антигенсвязывающей способностью, содержит К и μ-детерминанты, имеет молекулярную массу 50 000 - 60 000, активирует
В-лимфоциты в отсутствие Т-клеток п представляет собой 7SIgM. Этот фактор часто обозначают символом IgT (т. е. иммуноглобулин
Т-клеток). М. J. Taussig и A. J. Munro (1975) также описали антигенспецифический фактор с молекулярной массой 50 000, который
является продуктом субобластей I-А и I-В комплекса Н-2. Он способен замещать вспомогательную функцию Т-клеток и, по-видимому,
является рецептором Т-клеток. Авторы считают, что этот фактор не является иммуноглобулином. Фактор, описанный Т. Tada и соавт.
(1976), также обладает специфической антигенсвязывающей способностью, имеет молекулярную массу 30 000-60 000, не содержит
иммуноглобулиновых детерминант, кодируется генами субобласти I-A.
В целом, согласно современным представлениям, вспомогательная функция Т-лимфоцитов сводится к передаче антигена в соответствующей
иммуногенной форме (антигенсвязывающий рецептор Т-клетки или комплекс IgT-антиген), очевидно, через посредство макрофагов
В-лимфоцитам (специфический сигнал). Молекулы связанного с антигеном продукта Т-клеток имеют свободные фрагменты Fc тяжелых цепей,
которыми они присоединяются к соответствующим рецепторам макрофагов. Возникает концентрированная "обойма" антигенных молекул,
ориентированных своими эпитопами наружу, которая подается В-лимфоциту.
Только такой массивный сигнал может включить В-лимфоцит в пролиферацию и дифференцировку. Присоединение к отдельным рецепторам
В-клеток единичных молекул антигена не является эффективным сигналом. Помимо специфического сигнала в виде "частокола" или "обоймы"
молекул антигена, необходим второй неспецифический сигнал, также исходящий из Т-лимфоцита, который включает размножение и
дифференцировку В-лимфоцита в плазматическую клетку-продуцента антител.
Взаимодействие Т- и В-лимфоцитов, угнетающее иммунный ответ
Тимусзависимые лимфоциты играют регуляторную роль в иммунном ответе. Они осуществляют позитивную регуляцию (т. е. усиливают ответ)
при вспомогательном (хелперном) взаимодействии с В-клетками (Т-В-кооперация) или с Т-клетками, предшественниками эффекторов клеточных
реакций, и негативную регуляцию (т. е. угнетают ответ) путем супрессивного влияния на ответ как В-, так и Т-клеток к антигену. Путь
введения антигена, его физико-химическая форма, доза, присутствие или отсутствие адъюванта, генотип животного имеют значение для
развития хелперных и супрессорных Т-клеток.
- Антигенспецифические Т-супрессоры
[показать]
В различных экспериментальных системах показано, что Т-клеткн толерантных животных
супрессируют иммунный ответ к антигену, вызвавшему толерантность, и переносят состояние иммунологической толерантности сингенным
реципиентам (инфекционная толерантность). Т-клетки, полученные из грудного лимфатического протока мышей, инъецированных толерогенной
дозой дезагрегированного куриного γ-глобулина, специфически супрессируют продукцию антител при адоптивном
[от англ. adoptive (восприимчивый)] переносе с В-клеткамн облученным реципиентам (Miller J. F. А. Р., 1974). Дополнительное
введение таким реципиентам Т-клеток восстанавливает иммунный ответ только при условии предварительной обработки "супрессирующей"
популяции анти-Θ-сывороткой и комплементом.
Наиболее четко роль Т-супрессоров в иммунологической толерантности показана при толерантности низкой зоны, индуцируемой
субоптимальными дозами антигена (Baker P. J., 1975). При толерантности высокой зоны, вызываемой введением сверхоптимальных доз
антигена неотвечаемость, по-видимому, реализуется на уровне В-клеток, так как удаление Т-клеток не влияет на иммунный ответ.
Индуцированные антигеном супрессорные Т-клетки отличаются высокой специфичностью. Например, Т-супрессоры, индуцированные сывороточным
альбумином человека, не оказывают влияния на иммунный ответ к сывороточному альбумину кролика. В настоящее время накопилось
большое число данных о том, что Т-клетки предиммунизированных животных также могут оказывать негативное влияние на высоту и
качество иммунного ответа.
Т-супрессоры угнетают продукцию иммуноглобулинов разных классов. Т. Tada и соавт. (1975) показали, что тимоциты или клетки
селезенки крыс, иммунизированных носителем - экстрактом аскарид или конъюгатом ДНФ-экстракт аскарид, перенесенные облученным
реципиентам, иммунизированным динитрофенилированным экстрактом аскарид, супрессируют продукцию противогаптенных IgE-антител.
Супрессивная активность примированных (т. е. предиммунизированных) носителей клеток селезенки полностью отменялась при удалении
Т-клеток анти-Θ-сывороткой и комплементом или при предварительной тимэктомии доноров. Т-клетки мышей, двукратно
иммунизированных эритроцитами барана, специфически супрессируют продукцию IgM-антител при введении реципиентам, иммунизированным
динитрофенилированными эритроцитами барана. Т. Tada и соавт. показали также Т-клеточную супрессию продукции IgG-антител. Введение
Т-клеток мышей, гипериммунизированных гемоцианином, сингенным реципиентам одновременно или через 2 дня после иммунизации
ДНФ-гемоцианином, супрессирует продукцию IgG-антител, но слабо угнетает образование IgM-антител. Однако введение Т-клеток через
3 дня после иммунизации реципиентов преимущественно угнетает формирование IgM-антител и слабо влияет на продукцию IgG-антител.
В этой работе методом ингибиции бляшкообразования ε-ДНФ-L-лизином обнаружено, что Т-супрессоры вызывают снижение аффинитета
антител против ДНФ, которые секретируются IgM- и IgG-бляшкообразующими клетками. Напротив, удаление Т-клеток-супрессоров
сопровождается синтезом антител с повышенным аффинитетом.
По-видимому, Т-супрессоры либо прямо, либо опосредованно контролируют этапы дифференцировки В-клеток, начиная от стадии
виргидной (девственной) Вμ -клетки до высокоавидной Вα - клетки.
Таким образом, Т-супрессоры, возникающие после контакта с антигеном, могут специфически угнетать иммунные реакции. Регуляторное
действие этих супрессоров распространяется на образование антител разных классов и на дифференцировку В-клеток в ходе иммунного
ответа.
В последнее время установлено, что реакции клеточного иммунитета, требующие для своего развития Т-Т-взаимодействия, также
находятся под регуляторным влиянием Т-супрессоров. Так, иммунизация мышей аллоантигенами приводит к развитию Т-супрессоров,
угнетающих реакцию смешанных аллогенных лимфоцитов in vitro (Rich S. S., Rich R. R., 1974). Обнаружено, что активированные
антигенами гистосовместимости Т-клетки, извлеченные из селезенки аллоиммунизированных реципиентов, оказывают супрессивное
действие на реакцию смешанных лимфоцитов, а Т-клетки, выделенные из лимфатических узлов тех же реципиентов, усиливают пролиферативный
ответ в смешанных культурах лимфоцитов.
- Антигеннеспецифические Т-супрессоры
[показать]
Одним из существенных синдромов болезни рант [Болезнь рант характеризуется карликовостью, истощением,
поражением внутренних органов в результате лимфоцитарной агрессии (подробно см. Петров Р. В., 1968)] и других форм реакции
"трансплантат против хозяина" является иммунодепрессия, выражающаяся в резком угнетении иммунологической реактивности
реципиента. При этом в лимфоидной ткани животных накапливается большое количество лимфоцитов, относящихся к классу
Т-супрессоров. Этот процесс используют для получения взвеси клеток, обогащенной Т-супрессорами.
С. С. Гамбаров и соавт. (1975) гибридным мышам (СВА Х C57BL)F1 вводили клетки селезенки родительского генотипа
СВА, через 7 дней реципиентов иммунизировали эритроцитами барана и определяли продукцию АОК. Показано, что перенос клеток
селезенки мышей линии СВА реципиентам F1 значительно супрессирует продукцию АОК. Супрессия антителогенеза
опосредуется трансплантированными Т-клетками донорского происхождения, активированными антигенами гистосовместимости реципиента.
Селезенку таких реципиентов можно использовать в качестве клеточной популяции, обогащенной Т-супрессорами. Интересно, что
дополнительное введение клеток лимфатических узлов мышей линии СВА существенно снижает супрессивный эффект, индуцируемый
селезеночными Т-супрессорами. Эти данные свидетельствуют о том, что при проявлении супрессорных функций Т-клеток, очевидно,
происходит взаимодействие между различными субпопуляциями Т-лимфоцитов. Действительно, М. Feldmann и соавт. (1977) показано,
что индукция супрессорных клеток (фенотип Ly 1-2+3+1а+) требует взаимодействия двух
типов Т-клеток: хелперов супрессирующих клеток (Ly 1+2+3+1а-) и предшественников
супрессирующих клеток (Ly 1-2+3+1а-).
О неспецифической супрессивной активности Т-клеток свидетельствует в условиях индукции Т-дефицитного состояния повышение
иммунного ответа у мышей к тимуснезависимым антигенам, пневмококковому полисахариду, поливинилпирролидону и бактериальному
липополисахариду. Показано, что однократное введение мышам разных линий антилимфоцитарной сыворотки (АЛС) одновременно с
иммунизацией пневмококковым полисахаридом приводит к значительному повышению продукции антител к этому антигену (Baker P. J., 1975).
Однократное введение сравнительно небольших доз АЛС сопровождается элиминацией Т2-клеток, следствием чего является
угнетение гуморального и клеточного иммунитета против тимусзависимых антигенов. Однако такая обработка АЛС сопровождается
усилением иммунного ответа к тимуснезависимым антигенам - линейным полимерам, состоящим из идентичных дисахаридных повторяющихся
единиц. Продукция антител к таким антигенам возникает исключительно на уровне В-клеток и представляет собой преимущественно
IgM-ответ. Следовательно, продукция антител к тимуснезависимому антигену является результатом прямой стимуляции этим антигеном
клона В-клеток. Вместе с тем хотя иммунный ответ к тимуснезависимым антигенам не требует участия Т-хелперов, он находится под
регулирующим влиянием Т-супрессоров. Действительно, стимулирующий эффект AЛC на выработку антител к тимуснезависимому антигену
отменяется при введении реципиентам сингенных тимоцитов.
Антигеннеспецифическую Т-клеточную супрессивную активность демонстрируют также опыты с тимэктомией взрослых мышей, которая
приводит к элиминации T1-клеток в течение 2- 3 нед (Potter V., Trainin N., 1974). Установлено, что тимэктомия взрослых
мышей значительно усиливает иммунный ответ мышей на поливинилпирролидон. Трансплантация вилочковой железы или тимоцитов
тимэктомированным животным отменяет (нормализует) повышенный иммунный ответ.
Т-лимфоциты мышей, предварительно инъецированных (за 24 ч до их извлечения) конканавалином А (150 мкг), супрессируют продукцию
АОК к эритроцитам барана в культуре клеток селезенки in vitro (Rich R. R., Pierce C. W., 1973). Эти данные объясняют
иммунодепрессивный эффект конканавалпна A in vivo активацией Т-супрессоров. На разных моделях показано, что Т-клетки, активированные
конканавалином А, угнетают развитие как гуморального, так и клеточного иммунитета. Аналогичным свойством активировать Т-супрессоры
обладает другой митоген Т-клеток - ФГА. Интересно, что неспособность клеток селезенки новорожденных мышей к развитию иммунного
ответа к гетерологичным антигенам in vivo, а также в культуре in vitro, связана с деятельностью селезеночных Т-супрессоров.
Т-клетки из селезенки новорожденных мышей супрессируют продукцию антител клетками селезенки взрослых мышей. Добавление к клеткам
селезенки новорожденных мышей Т-клеток взрослых сингенных доноров повышает продукцию антител только при условии предварительной
элиминации Т-клеток новорожденных. Эти данные могут свидетельствовать в пользу гипотезы о регулирующей роли Т-супрессоров в
поддержании аутотолерантности.
- Подавление аллотипа Т-супрессорами
[показать]
Аллотип - структурная характеристика иммуноглобулинов, не связанная с
основными функциями данных белков и указывающая лишь на их внутривидовой полиморфизм - наличие своего аллельного гена для
каждого аллотипического иммуноглобулина. |
Феномен хронической супрессии аллотипа служит примером регуляторного действия Т-супрессоров на синтез иммуноглобулинов.
Известно, что мыши, контактировавшие с антителами против аллотипа иммуноглобулина в перинатальном периоде жизни, неспособны
к продукции антител с данным аллотипом после рождения. Перенос смеси клеток селезенки мышей с супрессированным аллотипом вместе с
нормальными сингенными клетками селезенки облученным реципиентам приводит к супрессии продукции нормальными спленоцитами
иммуноглобулинов с данным аллотипом (Herrenberg L. A. et al., 1976). Например, если самцов мышей SJL (Igb) скрестить
с самками линии BALB/c (Iga), предварительно иммунизированными антителами с аллотипом Ig - Ib, то их потомство
не будет синтезировать антител с аллотипом Ig - Ib. При переносе клеток селезенки этих мышей вместе с клетками селезенки
нормальных доноров (BALB/c X SJL)F1 облученным реципиентам линии BALB/c наблюдается супрессия продукции общего
сывороточного Ig - Ib. При добавлении к клеткам селезенки мышей с супрессированным аллотипом клеток селезенки интактных
доноров, примированных ДНФ, происходит супрессия противогаптеновых АОК с аллотипом Ig - Ib. Аналогичные данные получены
при добавлении супрессорных клеток в культуры нормальных клеток селезенки in vitro. Обработка клеток селезенки мышей с
супрессированным аллотипом анти-Θ-сывороткой и комплементом отменяет их супрессивную активность in vivo и in vitro. Клетки,
индуцирующие супрессию аллотипа, помимо селезенки, содержатся в лимфатических узлах, вилочковой железе и костном мозге.
Т-супрессоры аллотипа угнетают синтез антител, несущих одну аллотипическую детерминанту. При этом другие аллотипы иммуноглобулинов
продуцируются нормально. Однако угнетение продукции одного аллотипа иммуноглобулинов распространяется на всю поликлональную
популяцию В-клеток, синтезирующих этот аллотип, т. е. снижается образование специфических антител к различным антигенам.
L.A. Herrenberg и соавт. (1976) считают, что Т-супрессоры аллотипа угнетают функциональную активность Т-хелперов, но имеются
основания полагать, что мишеныо для Т-супрессоров аллотипа являются непосредственно В-клетки, вырабатывающие антитела этого
аллотипа (Eichmann К., 1975).
- Подавление Т-супрессорами идиотипа
[показать]
Идиотип - индивидуальное свойство антител, связанное с характерной особенностью
строения их активного центра (участка, взаимодействующего с антигеном); данное свойство выявляется серологически.
|
Регуляторное действие Т-супрессоров на синтез иммуноглобулинов демонстрируется
также на примере подавления продукции идиотипа. Показано, что предварительное введение мышам гетерологичных антиидиотипических
антител приводит к подавлению синтеза данного идиотипа, которое опосредуется активностью Т-клеток-супрессоров (Eichmann К., 1975).
Хроническая супрессия идиотипа переносится сингенным реципиентам клетками селезенки. Обработка супрессорных клеток
анти-Θ-сывороткой и комплементом отменяет эффект подавления идиотипа. Т-супрессоры идиотипа угнетают продукцию иммуноглобулинов
данного идиотипа, но синтез других вариантов антител при этом не изменяется, т. е. снижается синтез антител всей поликлональной
популяции В-клеток, потенциально способных вырабатывать антитела данного идиотипа.
- Маркеры и распределение Т-клеток-супрессоров в лимфоидных органах
[показать]
Т-супрессоры, как и Т-хелперы, несут поверхностный Θ-антиген, но они различаются по наличию
Ly-антигенов. Т-супрессоры, активированные конканавалином А или ФГА, являются Ly 2+, 3+, а Т-хелперы
относятся к Ly 1+.
Детальные исследования, проведенные с использованием клеточных культур, примированных гемоцианином, показали, что зрелые
Т-супрессоры относятся к Ly 1-2+3+1а+-клеткам, а хелперные клетки являются
1+2+3+1а- (Feldmann М. et al., 1977), Известно, что Т-супрессоры имеют поверхностные
рецепторы к гистамину. Клетки селезенки в опытах М. Feldmann и соавторов продуцировали значительно больше антител после пропускания
через колонку с комплексом гистамин - сывороточный альбумин - сефароза. Оказалось, что эффект связан с удалением из популяции клеток
селезенки Т-клеток-супрессоров.
Хотя предшественники как хелперных, так и супрессорных Т-клеток образуются в вилочковой железе, распределение Т-хелперов и
Т-супрессоров в миелолимфоидных тканях различается. Так, индуцированные антигеном Т-супрессоры выявляются в большом количестве в
вилочковой железе и селезенке, в меньшем числе - в лимфатических узлах, грудном лимфатическом протоке и очень редко - в костном
мозге (Katz D. И., Benacerraf В., 1972). Индуцированные антигеном (примированные) Т-клетки-хелперы преимущественно выявляются в
селезенке, лимфатических узлах и среди лимфоцитов грудного протока, но не выявляются в вилочковой железе и костном мозге.
С. С. Гамбаров и Р. М. Хаитов (1977) показали, что в костном мозге мышей содержатся Т-супрессоры или их предшественники, которые
угнетают развитие кооперативной иммунной реакции к эритроцитам барана.
- Механизм действия Т-супрессоров
[показать]
В последние годы рядом исследователей выделены и успешно изучаются свойства гуморальных
медиаторов антигеноспецифических Т-супрессоров. В 1974 г. М. Zembala и G. L. Asherson выделили гуморальный фактор Т-клеток,
обладающий супрессивной активностью. Ими было показано, что супернатант 48-часовой культуры Т-клеток лимфатических узлов мышей,
обработанных пикрил-сульфоновой кислотой, обладающих супрессивной активностью, специфически супрессирует развитие кожной
гиперчувствительности замедленного типа к пикрилхлориду. Активное начало этого супрессирующего фактора не разрушается при 56 °С
при замораживании - размораживании, адсорбируется на колонках с комплексом пикрилхлорид - альбумин, имеет молекулярную массу 50 000
и не является иммуноглобулином. Предполагают, что эти специфические молекулы могут комбинироваться с антигеном на поверхности
сенсибилизированных клеток и предотвращать выделение лимфокинов либо образуют комплексы с антигеном, которые блокируют рецепторы
Т-клеток для антигена.
М. Feldmann (1974) также была сделана попытка идентифицировать специфический супрессирующий фактор. Клетки селезенки,
предыммунизированные конъюгатом ТНФ-гемоцианин, инкубировались с супернатантом культур активированных Т-супрессоров (в качестве
активирующего антигена использовали конъюгат динитрофенол - птичий γ-глобулин или динитрофенол-у-глобулив человека или
птичий γ-глобулин). Оказалось, что супрессия ответа гаптенреактивных В-клеток наблюдается только в присутствии гаптена,
соединенного с носителем, к которому реактивны Т-клетки. Растворимый супрессирующий фактор, содержащийся в супернатанте
активированных Т-клеток, полностью абсорбировался макрофагами. Серологическое изучение этого фактора выявило, что он обладает рядом
свойств IgT (антигеноспецифический фактор кооперации, выделяемый Т-хелперами): абсорбируется на бусах, покрытых антисыворотками
против Ig, κ- или μ-цепей Ig, но не нормальным IgG кролика.
Однако в исследованиях других авторов были получены данные, свидетельствующие, что медиатор антигенспецифических Т-супрессоров
не является иммуноглобулином. Решающие данные о природе медиатора Т-супрессоров были получены Т. Tada и соавт. и В. Benecerraf и
соавт. Т. Tada и соавт. (1975) показали, что бесклеточный экстракт, приготовленный механическим разрушением тимоцитов или клеток
селезенки, содержащих супрессорные Т-клетки, обладает супрессивным свойством. Бесклеточный экстракт, полученный из тимоцптов крыс,
примированных антигеном аскарид, ингибирует продукцию IgE у крыс, иммунизированных конъюгатом ДНФ - экстракт аскарид. Экстракт,
выделенный из тимоцитов мышей, примированных гемоцианином, угнетает продукцию IgG у сингенных животных, иммунизированных ДНФ -
гемоцианином. Крысиный и мышиный факторы относительно специфические и супрессируют продукцию антигаптеновых антител у животных,
иммунизированных гаптеном, конъюгированным только со специфическим носителем.
Методом гель-фильтрации показано, что активность супрессирующего фактора представляет собой протеин с молекулярной массой
35 000-60 000. Фактор разрушается трипсином и проназой, но устойчив к действию нуклеаз. Супрессивная активность экстрактов
удаляется при пассировании через иммуноадсорбенты с соответствующим специфическим антигеном (носителем). Таким образом,
супрессирующие молекулы комплементарны к молекуле носителя, но не гаптена. Активность супрессирующего фактора не удаляется при
пропускании через иммуноадсорбенты, содержащие антитела против Ig, Fab-фрагмента, μ-цепи, или γ-цепи, т. е. супрессирующие
молекулы не являются иммуноглобулинами или их фрагментами. Однако активность супрессирующего фактора удаляется аллоантителами
против антигенов, кодируемых областью I комплекса Н-2 мышей донорской линии, т. е. фактор является продуктом генов комплекса Н-2.
Эти данные показывают, что активно супрессирующий компонент не является антителом в классическом понимании, но он вместе с тем имеет
антигеноспецифические реактивные участки и может быть продуктом гена I-области.
ГАТ - синтетический антиген, полученный сополимеризацисй
глутаминовой кислоты, аланина и тирозина. |
Принципиально аналогичные данные получены В. Benecerraf и соавт. (1975). При помощи методики выделения медиатора Т-супрессоров
по Т. Tada авторы экстрагировали медиатор из примированных ГАТ Т-клеток линий мышей, не отвечающих на этот антиген. Этот экстракт
оказывал ГАТ-спецнфическое супрессорное действие in vivo и in vitro. Установлено, что молекула супрессорного фактора является
белком с молекулярной массой 45 000, обладает аффинитетом к ГАТ, не содержит детерминант постоянных областей легких или тяжелых
цепей иммуноглобулинов, не содержит антигенов, кодируемых областью I комплекса Н-2. Предполагают, что фактор формируется из комплекса
ГАТ с ГАТ-специфичным продуктом Ir-генов. Таким образом, иммуносупрессивный эффект Т-супрессоров опосредуется через гуморальный
фактор, представляющий собой белок, кодируемый генами комплекса Н-2, аффинный (имеющий сродство) к антигену и не содержащий
иммуноглобулиновых детерминант.
Важным является вопрос о природе клеток-мишеней для супрессирующего фактора. Ответ на него получен в следующих опытах. Клетки
селезенки мышей, примированных комплексом ДНФ - экстракт аскарид (ДНФ-примированные клетки), культивировали in vitro в присутствии
гомологичного антигена ДНФ - экстракт аскарид. Добавление в эти культуры экстракта Т-клеток, примированных экстрактом аскарид,
но не гемоцианином, супрессирует вторичный иммунный ответ, развивающийся в этих культурах. В последующих опытах культивировали
клетки селезенки, примированные ДНФ - экстракт аскарид в присутствии ДНФ - экстракт аскарид и ДНФ-гемоцианином для индукции
вторичного ответа. В этой ситуации ДНФ-примированные В-клетки комбинированы с ДНФ - экстракт аскарид и ДНФ - гемоцианин. Добавление
примированного экстрактом аскарид экстракта Т-клеток супрессирует продукцию непрямых ДНФ-специфических АОК, но добавление экстракта
Т-клеток, примированных гемоцианином, не приводит к супрессии. Следовательно, аскаридоспецифический фактор Т-клеток эффективен
только в присутствии специфических хелперных Т-клеток. Другими словами, мишенью для действия супрессирующего фактора являются
Т-хелперы.
Недавно установлено, что Т-супрессоры (активированные конканавалином А), оказывают ингибирующее действие на продукцию АОК
в культуре in vitro путем инактивации гуморального фактора Т-хелперов. В случае Т-клеточной супрессии клеточного иммунитета
клетками-мишенями являются Т-клетки-эффекторы. Показано, что Т-супрессоры угнетают клеточные иммунные реакции в результате
подавления пролиферации и дифференцировки Т-клеток-эффекторов. Что касается природы клеток-мишеней при супрессии антителогенеза к
тимуснезависимым антигенам, то Т-супрессоры, по-видимому, угнетают пролиферацию непосредственно В-клеток, отвечающих на антиген.
Необходимо подчеркнуть, что опосредованная Т-клетками супрессия носит обратимый характер. При удалении супрессирующего действия
Т-клеток функции супрессированных мишеней восстанавливаются. Иначе говоря, клетки-мишени при этом не убиваются.
- Генетический контроль Т-супрессоров
[показать]
Т. Таda и соавт. (1975) одними из первых показали, что супрессивный эффект Т-клеток
находится под генетическим контролем. В опытах in vivo супрессирующий фактор Т-клеток, полученный от Н-2 несовместимых доноров, не
угнетает иммунный ответ в комбинациях донор-реципиент: BALB/c -> C57BL и C57BL -> BALB/c, но в сочетании ВАLВ/с -> ДВА/2 (обе
линии H-2d), идентичном по комплексу Н-2, действие супрессивного фактора реализуется. В последующий работе М. Taniguclii
и соавт. (1976) проанализировали способность факторов Т-супрессоров, полученных от мышей линий BALB/c, С3Н, СВА и
(BALB/c X CBA)F1, угнетать иммунный ответ в культуре in vitro клеток селезенки мышей разных линий. Оказалось, что
супрессирующий фактор угнетает иммунный ответ только Н-2-совместимых клеток. Фактор Т-клеток мышей (BALB/c X CBA)F1
подавляет иммунный ответ клеток обеих родительских линий. Иначе говоря, на Т-супрессорах F1-гибридов экспрессируются
кодоминантно супрессорные молекулы, реактивные к обеим родительским линиям. Наряду с этим ответ клеток селезенки мышей
(BALB/c X CBA)F1 супрессируется факторами Т-супрессоров мышей обеих родительских линий, т. е. на клетках-мишенях
F1 кодоминантно проявляются оба акцепторных участка для супрессивных факторов родительского происхождения. При помощи
мышей конгенных и рекомбинантных линий показано, что для взаимодействия клетки-супрессора и клетки-мишени и реализации
супрессорного эффекта необходима идентичность между ними по областям К и I комплекса Н-2. При несовместимости по этим областям
эффект супрессии не реализуется. Предполагают, что синтез супрессорной молекулы и синтез акцепторной молекулы кодируют разные
Ir-гены комплекса Н-2, так как имеются линии мышей, способные экспрессировать только одну из двух молекул.
Для изучения генетических свойств антигеноспецифического супрессирующего фактора Т-клеток экстракт Т-клеток мышей линии ВALB/c
(Н-2), примированных гемоцианином, адсорбировали иммуноадсорбентами, содержащими антитела против субрегионов Н-2 и затем добавляли
в тест-культуры in vitro клетки-селезенки, примированные ДНФ-гемоцианином (Tada Т. et al.r 1975; Taniguchi М. et al., 1976).
Антисыворотка против H-2d полностью удаляет супрессивную активность. Антисыворотка против К-конца комплекса Н-2
(анти-Кd, I - Ad, I - Bd) также адсорбирует супрессивную активность, но антисыворотка против
D-конца (анти-Dd, I - Od) не влияет на супрессивное действие фактора. Работы последнего времени демонстрируют,
что супрессирующий фактор Т-клеток является продуктом I-области, кодируемым генами субрегиона I-J.
Таким образом, способность генерировать Т-клетки-супрессоры синтез ими специфического медиатора и продукция акцепторной
молекулы на Т-хелперах мишенях контролируются генами I-области комплекса Н-2.
В-супрессоры
В настоящее время становится ясным, что на различные формы иммунного ответа оказывает супрессивное действие несколько различных
систем, опосредующих свое действие через различные клетки (Т-клетки, В-клетки, макрофаги).
Р. В. Петровым и соавт. (1976) выявлена неспецифическая и антигеноспецифическая супрессия гуморального иммунного ответа клетками
костномозгового происхождения. В первых опытах этой серии исследований мышам линий СВА и C57BL, соответственно высоко- или
низкоотвечающим на эритроциты барана, вводили внутривенно сингенные клетки лимфатических узлов, селезенки, костного мозга или
вилочковой железы интактных доноров: вместе с эритроцитами барана и определяли продукцию АОК в селезенке. Оказалось, что
трансплантация клеток лимфатических узлов, костного мозга или вилочковой железы мышам линии C57BL, генетически низкореагирующим
на эритроциты барана, значительно повышает их иммунный ответ. Напротив, перенос клеток лимфатических узлов или костного мозга, но
не тимоцитов мышам линии СВА, генетически высокореагирующим на данный антиген, приводит к значительной супрессии иммунного ответа.
Обработка доноров лимфатических узлов или селезенки циклофосфамидом в дозе, избирательно элиминирующей только В-клетки отменяет
эффект супрессии.
Перенос мышам линии СВА клеток селезенки, полученных через 7 дней после иммунизации доноров, приводит к значительно большей
супрессии иммунного ответа, чем перенос интактных клеток селезенки. Эффект специфичен, так как клетки селезенки доноров,
иммунизированных посторонними антигенами, оказывали такое же супрессивное действие, как и клетки интактных доноров. Более выраженная
супрессия иммунного ответа, наблюдаемая при введении иммунных клеток селезенки, по сравнению с интактными спленоцитамп, очевидно,
происходит за счет большего содержания В-клеток супрессоров в лимфоидных органах после пика ответа, поскольку, начиная с этого
времени, продукция АОК резко снижается. В дальнейших исследованиях (Petrov P. V., Khaitov R. М., 1977) было установлено, что перенос
сингенных гидрокортизонорезистентных тимоцитов и активированных антигеном Т-клеток (клетки селезенки летально облученных мышей,
инъецированных тимоцитами и эритроцитами барана) не приводит к супрессии иммунного ответа. Напротив, перенос популяции В-клеток
успешно супрессирует иммунный ответ. Введение большой дозы В-клеток (107 клеток селезенки тимэктомированных летально
облученных и восстановленных костным мозгом мышей) супрессирует иммунный ответ и у низкореагирующей линии мышей C57BL. В отличие
от использованных доз клеток костного мозга и лимфатических узлов эта клеточная суспензия содержит значительно больше В-клеток, но
практически не содержит Т-клеток.
Хотя на различных экспериментальных моделях in vitro было показано, что клетки костного мозга продуцируют факторы, стимулирующие
антителогенез (Михайлова А. А. и др., 1971), оказалось, что непосредственное добавление клеток костного мозга в культуры in vitro
лимфоидных клеток подавляет продукцию антител к различным антигенам (Петров Р. В. и др., 1977; Duwe А. К., Siughal S. К., 1976).
Взятые вместе, эти данные позволяют говорить о регуляторной роли костно-мозговых клеток в антителогенезе.
В этой связи представляет большой интерес диссоциация стимулирующего и супрессирующего эффектов костного мозга (Петров Р. В. и
др., 1977; Атауллаханов Р. П., 1978). Авторы культивировали в двухкамерных флаконах in vitro клетки селезенки и костного мозга в
смеси или разделенными миллипоровой мембраной. Во все культуры добавляли эритроциты барана. Оказалось, что реализация костным мозгом
гуморального фактора, стимулирующего продукцию антител, не требует прямого контакта между клетками костного мозга и селезенки.
Гуморальный фактор костного мозга, супрессирующий продукцию антител, вырабатывается в результате прямого контакта клеток костного
мозга с активно пролиферирующими атигенстимулированными лимфоцитами селезенки. Схема основных экспериментов представлена на рис. 59.
Совместное культивирование сингенных клеток костного мозга и селезенки мышей СВА, разделенных миллипоровой мембраной, приводит к
стимуляции образования антителопродуцентов и усилению включения 3Н-тимидина клетками селезенки. Однако в случае
культивирования в нижней камере смеси клеток селезенки и костного мозга происходит резкое подавление антителогенеза и пролиферации
клеток селезенки, содержащихся в верхней камере.
Важен тот факт, что в смешанпых культурах клеток костного мозга и селезенки, несмотря на практически полное подавление
образования антителопродуцентов, имеет место активная клеточная пролиферация. Особенно интенсивно включается 3Н-тимидин
в культурах, содержащих только клетки селезенки или смесь клеток костного мозга и селезенки. В монокультурах клеток костного мозга
включение метки идет менее интенсивно. Дискриминативный анализ пролиферирующих клеток в смешанных культурах, состоящих из равных
количеств клеток костного мозга и селезенки, проведенный с использованием хромосомного маркера Т6Т6, показал, что в первые 2 сут
культивирования митотическая активность клеток костного мозга и клеток селезенки в смешанных культурах примерно одинакова. Однако
через 3 сут после начала культивирования в смешанной культуре почти 80% делящихся клеток были костномозговыми. На 4-е сутки инкубации
практически все делящиеся клетки в смешанной культуре были костно-мозгового происхождения. Таким образом, к концу инкубации в
смешанных культурах полностью прекращается митотическая активность селезеночных клеток при сильной активации пролиферации
костно-мозговых клеток.
Возникает вопрос, какие клетки костного мозга являются супрессорами. Показано, что супрессивное действие костного мозга на
антителогенез связано с наличием в популяции костно-мозговых клеток неприлипающих средних лимфоцитов, резистентных к действию
антн-Θ- и антимакрофагальной сывороток, но чувствительных к обработке антииммуноглобулиновой сывороткой (Duwe А. К.,
Singhel S. К., 1976). В наших опытах для определения природы костно-мозговых супрессоров клетки костного мозга инкубировали с
антисыворотками против MBLA или против иммуноглобулинов и комплементов (Петров Р. В. и др., 1978). Установлено, что обработка
костного мозга этими антисыворотками, обладающими специфической цитотоксичностью по отношению к В-лимфоцитам, значительно снижает
супрессивную активность клеток костного мозга. Таким образом, костномозговыми супрессорами являются клетки с поверхностными маркерами
В-лимфоцитов.
Обнаружено, что введение мышам оксимочевины в концентрации, приводящей к избирательному цитолизу активнопролиферирующих клеток
в костном мозге, сопровождается полной отменой супрессивного эффекта костномозговых клеток (Петров Р. В. и др., 1978). Иначе говоря,
субпопуляция костномозговых клеток-супрессоров является активнопролиферирующей in situ. Изложенные выше данные позволили более точно
охарактеризовать костномозговые супрессоры. В развитии В-лимфоцита можно выделить следующие основные стадии: стволовая клетка ->
стволовая клетка лимфоидного ряда -> предшественник В-лимфоцитов делящаяся переходная клетка -> неделящаяся нулевая клетка ->
неделящийся незрелый В1-лимфоцит -> неделящийся зрелый В2-лимфоцит. На наш взгляд, наиболее вероятным
кандидатом на роль костномозговой клетки-супрессоры является предшественник В-лимфоцита. Именно эта клетка несет и поверхностные
иммуноглобулины и активно пролиферирует.
S.I. Katz и соавт. (1974) показали существование В-лимфоцитов супрессоров клеточного иммунитета, которые стимулируются при
нормальной иммунизации. Эти В-супрессоры влияют на эффекторное звено реакций ГЗТ и проявляют свое угнетающее действие в течение 1 ч
после внутривенного введения.
Можно предполагать, что функциональная роль антигеноспецифических В-супрессоров сводится к гомеостатической регуляции иммунного
ответа и к ограничению его величины. Биологическое значение костномозговых В-супрессоров, неспецифическп угнетающих антителогенез
при прямом контакте с антигенстимулированными клетками селезенки, заключается, очевидно, в том, чтобы блокировать иммуногенез в
костном мозге in situ.
Хорошо известно, что иммунизация приводит к продукции АОК в селезенке и в лимфоидных тканях, но не в костном мозге. Возможно,
что именно костно-мозговые В-супрессоры призваны "запрещать" иммуногенез в костном мозге in situ. Таким образом, популяции
регуляторных клеток составляют сложные клеточные коллективы, взаимодействие которых с другими лимфоидными клетками обеспечивает
поддержание иммунологического гомеостаза.
Продолжение: Гормоны и медиаторы иммунной системы
К оглавлению
Литература
[показать]
- Безин Г. И., Хаитов Р. М., Мороз Б. Б. и др. Факторы, контролирующие рециркуляцию стволовых клеток. Сообщение 2. Влияние АКТГ на миграцию стволовых кроветворных клеток из экранированного участка костного мозга у облученных мышей.- Радиобиология, 1975 вып. 2, с. 193-196.
- (Безин Г. И., Хаитов Р. М., Мороз Б. Б. и др.) Bezin G. Khaitov R. М., Moroz В. В. et al. The factors controlling stem cell recirculation. II. ACTH-induced inhibition of migration of hemopoietic stem cells. - Blood., 1975, v. 46, p. 79-84.
- Воробьев А. А., Васильев H. H. Адъюванты.- М.: Медицина, 1969.
- Гамбаров С. С., Петров Р. В., Хаитов Р. М., Норимов А. Ш. Повышение активности селезеночных клеток-супрессоров у мышей при опухолевом росте. - Докл. АН СССР, 1975, т. 224, № 5, с. 1195-1197.
- Гамбаров С. С., Хаитов Р. М. Супрессия антителогенеза костномозговыми Т-клетками, активированными антигенами гистосовместимости. - Бюлл. экспер. биол., 1977, № 3, с. 300-302.
- Зарецкая Ю. М., Пантелеев Э. И., Ковальчук Л. В. Особенности восстановления у радиационных химер антителогенеза в отношении различных антигенов. - Журн. микробиол., 1969, № 1, с. 27-30.
- Кабанов В. А., Евдаков В. П., Мустафаев М. И., Антипина А. Д. Кооперативное связывание сывороточного альбумина кватенизированными поли-4-винилпиридинами и структура образующихся комплексов. - Мол. биол., 1977, № 3, с. 582-597.
- Кабанов В. А., Мустафаев М. П., Норимов А. Ш. и др. Иммуногенность комплекса бычьего сывороточного альбумина с поликатионом, нагруженным гидрофобными боковыми группами. - Докл. АН СССР, 1978, т. 243, № 5, с. 1330-1333.
- Лопухин Ю. М., Петров Р. В. Новая классификация первичной иммунологической недостаточности.- Вестн. АМН СССР, 1974, № 3, с. 35-42.
- Лопухин Ю. М., Петров Р. В. Генетический контроль иммунного ответа а пути фенотипической коррекции. - В кн.: Международный генетический конгресс, 14-й. Материалы. М., 1978, с. 116-117.
- Лопухин Ю. М., Петров Р. В., Арион В. Я. и др. Тимозин. - В кн.: Актуальные проблемы трансплантации органов и тканей. М., 1978, с. 5-13.
- Михайлова А. А. Регуляторные клетки костного мозга в продуктивном периоде антителогенеза. - В кн.: Итоги пауки и техники. Иммунология. М., 1978, т. 7, с. 124-139.
- Михайлова А. А., Петров Р. В. Медиаторы клеточного иммунитета. - В кн.: Общие вопросы патологии. М., 1976, т. 5, с. 6-34.
- Михайлова А. А., Петров Р. В., Захарова Л. А. Синтез иммуноглобулинов в смешанных культурах сингенных клеток из различных лимфоидных тканей. - Докл. АН СССР, 1971, т. 197, № 1, с. 209-211.
- (Мороз Б. Б., Хаитов Р. М., Безин Г. И. и др.) Moroz В. В., Khaitov R. М., Bezin G. I. et al. Glukokorticoids and recirculation of hemopoietic stem cells. - In: International congress on pathological physiology 2-d. Proceedings, Praha, 1975, p. 270-279.
- Петров P. В., Хаитов P. М., Рачков С. М. Влияние гидрокортизона на отдельные этапы иммуногенеза.- Бюлл. экспер. биол., 1975, № 11, с. 63- 66.
- Петров Р. В. Введение в неинфекционную иммунологию. - Новосибирск: Наука, 1968.
- Петров Р. В. Роль гормонов и медиаторов в функционировании иммунной системы. - Вестн. АМН СССР, 1980, № 7, с. 11-17.
- (Петров Р. В., Хаитов Р. М.) Petrov R. V., Khaitov R. М. В-cell suppression of antibody response to sheep red blood cells in mice of High and low-responding genotypes. - Cell. Immunol., 1977, v. 28, p. 298-306.
- Петров P. В., Евдаков В. П., Хаитов Р. М. и др. Антигенные свойства пикратов полиоснований. - Докл. АН СССР, 1977, т. 236, № 5, с. 1260-1263.
- Петров Р. В., Хаитов Р. М. Искусственные полиэлектролиты - новые биологически активные соединения, влияющие на иммуногенез. - Мед. реф. журн., 1977, вып. 21, № 7, с. 18-27.
- Петров Р. В., Хаитов Р. М., Батырбеков А. А. Супрессивное действие сингенных В-клеток на иммунный ответ у мышей, относящихся к высоко-или низкореагирующим генотипам. - Докл. АН СССР, 1976, т. 226, № 6, с. 1446-1448.
- Петров Р. В., Хаитов Р. М., Атауллаханов Р. ИСидорович И. Г. Регуляторная роль костного мозга в иммунном ответе - стимуляция и супрессия. - Докл. All СССР, 1977. т. 237, № 4, с. 990-993.
- Петров Р. В., Хаитов Р. М. Синтетические полиэлектролиты и регуляция отдельных этапов иммуногенеза. - В кн.: Итоги науки и техники. Иммунология. М., 1978, т. 7, с. 223-244.
- (Петров Р. В., Михайлова А. А., Степаненко Р. Н., Захарова Л. A.). Petrov R. V., Mikhailova A. A., Stepanenko R. N., Zakharova L. A. Cell interactions in the immune response: effect of humoral factor released from bone marrow cells on the guantity of mature antibody producers in culture of immune lymph node cells. - Cell. Immunol., 1975, v. 17, p. 342-352.
- Петров P. В., Хаитов P. М., Кожинова E. S., Евдаков В. П. Замещение функции Т-клеток поли-4-винилпиридином при формировании первичного и вторичного иммунного ответа. - Цитология, 1975, № 10, с. 1172-1176.
- Хаитов Р. М. Новый принцип иммунодепрессии: угнетение отдельных этапов иммуногенеза (миграция стволовых. В- и Т-клеток и взаимодействия В- и Т-лимфоцитов). - Мед. реф. журн., 1975, вып. 21, № 3, с. 9- 20.
- Хаитов Р. М. Воздействие на отдельные этапы становления и взаимодействия Т- и В-клеток. В кн.: Итоги науки и техники. Общие вопросы патологии. М., 1976, с. 101-123, № 4.
- Хаитов Р. М., Кожинова Е. В., Батырбеков А. А. Повышение иммунного ответа у старых мышей с иммунологической недостаточностью. - Пат. физиол., 1975, № 4, с. 80-81.
- Хаитов Р. М., Петров Р. В., Мороз Б. Б., Безин Г. И. Факторы, контролирующие рециркуляцию стволовых клеток. Сообщение I. Влияние адренал-эктомии на миграцию кроветворных стволовых клеток из экранированного при облучении костного мозга. - Радиобиология, 1974, вып. 4, с> 516 521.
- (Хаитов Р. М., Петров Р. В., Мороз Б. Б., Безин Г. И.) Khaitov R. М., Petrov R. V., Moroz В. В., Bezin G. I. The factors controlling stem cell recirculation. I. Migration of hemopoietic stem cells in adrenalectomiced mice.- Blood, 1975, v. 46, p. 73-78.
- Arnon R., Nearon E., Sela М., Anfinsen C. Antibodies reactive with native lysozyme elicited by a completely synthetic antigen. - Proc. nat. Acad. Sci. (Wash.), 1971, v. 68, p. 1450-1455.
- Arnon R., Sela M. Antibodies to a unique region in lysozyme provoked by a synthetic antigen conjugate. - Proc. nat. Acad. Sci., 1969, v. 62, p. 163- 171.
- Bach J., Bach MBlanot D. et al. Thymic serum factor (FTS). - Bull. Inst. Pasteur., 1978, v. 76, p. 325-398.
- Baker P. Homeostatic control of antibody responses; a model based on the recognition of cell-associated antibody by regulatory T-cells. - Transplant. Bev., 1975, v. 26, p. 3-20.
- Beller D., Farr A., Unanue E. Regulation of lymphocyte proliferation and differentiation by macrophages. - Fed. Proc., 1978, v. 37, p. 91-96.
- Borek F., Kurtz J., Sela M. Immunological properties of a collagenlike synthetic polypeptide. - Biochim. biophys. Acta, 1969, v. 188, p. 314-319.
- Burnet F. М. Клеточная иммунология: Пер. с англ. - М.: Мир, 1971.
- Cantor П., Asofsky R. Synergy among lymphoid cells mediating the graft-versus-host response. - J. exp. Med., 1970, v. 131, p. 235-243.
- Dume A., Singhal S. Supression by soluble factor released from В cells. - In: Immune reactivity lymphocytes. 1976, p. 607-615.
- Eichmann K. Idiotype supperssion. II. Amplification of a suppressor T cell with anti-idiotypic activity. - Europ. J. Immunol., 1975, v. 5, p. 511-517.
- Elliott B., Haskill J. Characterization of thymus-derived and marrow-derived rosette-forming lymphocytes.- Europ. J. Immunol., 1973, v. 3, p. 68-74.
- Feldman M. T-cell suppression in vitro. II. Nature of specific suppressive factor.- Europ. J. Immunol., 1974, v. 4, p. 667-674.
- Feldman М., Beverly P., Woody ]., Me Kenzie I. T-T interactions in the induction of suppressor and helper T cells: analysis of membrane phenotype of precursor and amplifier cells. - J. exp. Med., 1977, v. 145, p. 793- 804.
- Feldmann М., Gorczynski R., Erb P., Desaymard C. Cell interactions in antibody production-problems of heterogeneity, diversity and regulation. - Im: Immune Recognition. New York, 1975, p. 755-769.
- Flanagan S. "Nude", a new hairless gene with pleiotropic effecs in the mouse. - Genet. Res., 1966, v. 8, p. 295-309.
- Goldstein A., Law Т., McAdoo M. et al. Thymosin: isolation and sequence analysis of an immunologically active thymic polypeptide. - Proc. nat. Acad. Sci., 1977, v. 74, p. 725-729.
- Hanks G. In vivo migration of colony-forming units from shielded bone marrow in the irradiated mouse. - Nature, 1964, v. 203, p. 1393-1395.
- Herzenberg L., Okamura K., Cantor H. et al. T-cell regulation of antibody responses: demonstration of allotype-specific helper T cells and their specific removal by suppressor T-cell. - J. exp. Med., 1976, v. 144, p. 330- 342.
- Hopkins W. Restoration of suppressor function in athymio mice. - Immunology, 1978, v. 34, p. 309-313.
- Katz D. The role of the histocompatibility gene complex in lymphocyte differentiation. - In: The Syhapse. New York, 1976, v. 41, p. 611-625.
- Katz S., Parker D., Turk J. В-cell suppression of delayed hypersensitivity reactions. - Nature, 1974, v. 251, p. 550-551.
- Langbeheim H., Arnon R., Sela M. Antiviral effect on MS-2 koliphage obtained with a synthetic antigen.- Proc. natl. Acad. Sci USA, 1976, v. 73, p. 4636.
- Lewis J., Trobangh F. Differentiation of hematopoietic stem cells. - Blood, 1964, v. 24, p. 654-655.
- Micklem H. S., Loutit J. Tissue grafting and radiation. - New York: Academic Press, 1966.
- Miller J. Lymphocyte interaction in antibody responses. - Int. Rev. Cytol., 1972, v. 33, p. 77-130.
- Miller J. Role of the cells which originate from the thymus and bone marrow. - Ann. Immunol., 1974, v. 125 C, p. 213-229.
- Miller J., Mitchell G. Cell to cell interaction in the immune response. I. Hemolysin-forming cells in neonatally thymectomized mice reconstituted with thymus of thoracic duct lymphocytes.-J. exp. Med., 1968, v. 128, p. 801.
- Nossal G., Cunningham A., Mitchell G., Miller J. Cell-to-cell interaction in the immune response. III. Chromosomal marker analysis of single antibody-forming cells in reconstituted, irradiated, or thymectomized mice.- J. exp. Med., 1968, v. 128, p. 839-853.
- Phillips R., Melchers F., Miller R. Stem cells and the ontogeny of В lymphocytes. International congress of immunology. Sydney, 1977, p. 155-161.
- Potter V., Trainin N. Thymus cell population exerting a regulatory function in the immune response of mice to polyvinilpirrolidone. - Cell. Immunol., 1974, v. 13, p. 76-86.
- Rich R., Pierce C. Biological expressions of lymphocyte activation. II. Generation of a population of thymus-derived suppressor lymphocytes. - J. exp. Med., 1973, v. 137, p. 649-653.
- Rich S., Rich R. Regulatory mechanism in cell-mediated immune responses.- J. exp. Med.. 1974, v. 140, p. 1588-1595.
- Rude E., Meyer-Delius М., Gundelach M. Immunological properties of synthetic sugar-polypeptide conjugates. Effect of N-lauroyl-glucosamine residues on immunogenicity. - Europ. J. Immunol., 1971, v. 1, p. 113-125.
- Sela M. Vaccins synthetiques: un reve on une realite? - Inst. Pasteur, 1974, v. 72, p. 72-86.
- Sela M. Synthetic, approaches to the immunology of the future. - In: International congress of immunology. Proceedings 3-d. Sydney, 1977, p. 720.
- Sela М., Schecuter B., Schecuter I., Borek F. Antibodies to segnential and conformational determinants. - Col. Spr. Harb. Symp. quant. Biol., 1967, v. 32, p. 537-545.
- Tada Т., Taniguchi MTakemori T. Properties of primed suppressor T cell and their products. - Transplant. Rev., 1975, v. 26, p. 106-129.
- Tada Т., Taniguchi М., Takemori T. The role of receptors for T cell products in antibody. - Immunol. Commun., 1976, v. 5, p. 717-736.
- Taniguchi М., IJajakawa K., Tada T. Properties of antigen-specific suppressive T cell factor in the regulation of antibody response of the mouse. II. In vitro activity and evidence for the I region gene product. - J. Immunol., 1976, v. 116, p. 542-548.
- Tanssig М., Munro A. Antigen-specific T-cell factor in cell cooperation and genetic control of the immune response. - In: Immune Recognition. New York, 1975, p. 791-803.
- Till J., McCulloch E. A durect measurement of the radiation sensitivity of normal mouse bone marrow cells. - Radiat. Res., 1961, v. 14, p. 213-222.
- Turk J., Poulter L. Selective depletion of lymphoid tissue by cyclophosphamide. - Clin. exp. Immunol., 1972, v. 10, p. 285-296.
- Zembala М., Asherson G. Depression of the T-cell phenomenon on contact sensitivity in mice. - Europ. J. Immunol., 1974, v. 4, p. 799-803.
|
|
На нашем форуме вы можете задать вопросы о проблемах своего здоровья, получить
поддержку и бесплатную профессиональную рекомендацию специалиста, найти новых знакомых и
поговорить на волнующие вас темы. Это позволит вам сделать собственный выбор на основании
полученных фактов.
Обратите внимание! Диагностика и лечение виртуально не проводятся!
Обсуждаются только возможные пути сохранения вашего здоровья.
Подробнее см. Правила форума
[X]
Беседы с опытным психологом по Skype. Консультации, психотерапия.
Стоимость 1 часа - 500 руб. (с 02:00 до 16:00, время московское)
С 16:00 до 02:00 - 800 р/час.
E-mail: aristo@newmail.ru
Последние сообщения
Реальный консультативный прием ограничен.
Ранее обращавшиеся пациенты могут найти меня по известным им реквизитам.
Нажми на картинку - узнай подробности!
Ссылки на внешние страницы
20.05.12
Уважаемые пользователи!
Просьба сообщать о неработающих ссылках на внешние страницы, включая ссылки, не выводящие прямо на нужный материал,
запрашивающие оплату, требующие личные данные и т.д. Для оперативности вы можете сделать это через форму отзыва, размещенную на каждой странице.
Ссылки будут заменены на рабочие или удалены.
Тема от 05.09.08 актуальна!
Остался неоцифрованным 3-й том МКБ. Желающие оказать помощь могут заявить об этом на
нашем форуме
05.09.08
В настоящее время на сайте готовится полная
HTML-версия МКБ-10 - Международной классификации болезней, 10-я редакция.
Желающие принять участие могут заявить об этом на нашем форуме
25.04.08
Уведомления об изменениях на сайте можно получить через
раздел форума "Компас здоровья" - Библиотека сайта "Островок здоровья"
|
|