kub
Островок  здоровья

----
  
записная книжка врача акушера-гинеколога Маркун Татьяны Андреевны
----
 
 
 

IX. Иммунологические механизмы клеточного гомеостаза

Предыдущая: Генетическое постоянство соматических клеток и уровень соматических мутаций

Иммунная система: стволовые клетки, Т- и В-лимфоциты

На рис. 58 представлена современная схема иммунопоэза (по докладу научной группы ВОЗ, 1977). Существование клеток, показанных на схеме, нашло всеобщее признание. Надо сказать, что существование лимфоидных стволовых клеток (LSC), возникающих из кроветворных стволовых клеток, обосновано совсем недавно. LSC генерируют два типа клеток: РТС - предшественники Т-клеток и РВС - предшественники В-клеток, из которых и развиваются популяции двух типов. Помимо Т-помощников, обеспечивающих совместно с макрофагами включение В-лимфоцитов в дифференцировку с накоплением антителопродуцентов, открыты Т-супрессоры. Последние блокируют включающее действие помощников, тормозят антителогенез, обеспечивают становление иммунологической толерантности. Гиперфункция супрессоров приводит к развитию гипогаммаглобулинемии; недостаточность по супрессорам влечет за собой аутоиммунные расстройства.

Большинство регистрируемых функций клеток иммунной системы осуществляется, по-видимому, через гуморальные факторы. Гомеостаз на уровне иммунной системы поддерживается сложными процессами клеточных взаимодействий и миграций.

Стволовые клетки костного мозга являются своего рода "семенным материалом" для всех лимфоидных тканей, поэтому костный мозг можно считать одним из центральных органов иммунной системы.

Стволовые клетки морфологически но идентифицированы. Тем не менее разработан прием их количественного учета в костном мозге и других кроветворных органах у мышей (Till J. Е., McCulloch Е. А., 1961). При введении летально облученным реципиентам клеток кроветворной ткани было обнаружено образование в селезенке дискретных колоний на 8-10-й день после переноса. С использованием костного мозга от облученных мышеи, содержащего определенный тип хромосомных аберраций, цитогенетическим анализом клеток колоний было доказано, что каждая колония в селезенке представляет собой клон, возникший из одной клетки-предшественницы. В дальнейших исследованиях было выявлено, что каждая колония состоит из нескольких миллионов незрелых клеток эритроидного, миелоидного или мегакариоцитарного ростка (Lewis J. P., Trobaugh F. Е., 1964). На основании функциональных признаков колониеобразующих единиц (КОЕ) и их способности к самоподдержанию их считают стволовыми клетками. Следует подчеркнуть, что одни и те же хромосомные аберрации обнаруживаются в КОЕ, Т-, В-лимфоцитах и других клетках крови (Phillips R. A. et al., 1977). Эти данные окончательно доказали полипотентность КОЕ. Концентрация стволовых клеток в костном мозге равна 10-4, в селезенке 10-5, в периферической крови 10-6 в расчете на ядросодержащие клетки.

В организме позвоночных кроветворная ткань располагается отдельными очагами (в костях скелета и селезенке), связь между которыми поддерживается через систему кровообращения. Кроветворная система четко реагирует как единый орган при локальных поражениях или при экстремальных состояниях, вызывающих повышенный запрос в кроветворении. Какие механизмы участвуют в интеграции кроветворной системы? Оказалось, что функционирование кроветворной ткани как физиологически единой системы осуществляется в значительной степени благодаря способности стволовых клеток к рециркуляции и обмену между различными участками кроветворной системы.

Первое четкое доказательство способности кроветворных стволовых клеток к миграции пришло из экспериментов, которые показали, что в периферической крови содержатся клетки, обладающие функцией стволовых и способные образовывать кроветворные колонии. Посредством специальных экспериментальных приемов, в основе которых лежит количественный учет КОЕ, выбрасываемых в кровоток, удалось рассчитать интенсивность циркуляции и перераспределения стволовых элементов между кроветворными тканями. В экспериментах Р.В. Петрова и Р.М. Хаитова (1972) мышей облучали с экранированием участка костного мозга и методом экзогенного клонирования КОЕ определяли репопуляцию стволовых клеток в облученные ткани и в кровь. Полученные данные свидетельствуют о том, что быстрая репопуляция гемопоэтических тканей у облученных (при экранировании участка костного мозга) мышей связана с выходом в кровоток стволовых клеток, которые циркулируют в организме, заселяя облученные ткани. В последующих опытах была сделана попытка ответить на вопрос, осуществляется ли восстановление именно благодаря миграции стволовых клеток или ведущее значение имеет гуморальная стимуляция из необлученных участков. Для решения этого вопроса осуществили парабиотическое соединение (целиарный анастомоз) мышей сингенных линий СВА/Н и СВА/Н-Т6Т6, клетки которых различимы по хромосомным маркерам. До операции одного партнера облучали тотально, а второму при этом экранировали задние конечности.

Хромосомный анализ клеток колоний в селезенке тотально облученного парабионта показал, что все колонии образовались из стволовых клеток, мигрировавших из экранированного костного мозга. Уверенность в этом послужила отправным моментом для количественной оценки интенсивности миграции стволовых клеток из экранированного участка костною мозга (Петров Р. В., Хаитов Р. М., 1972). Мышам во время облучения в дозе 800 Р экранировали правую заднюю конечность. Затем через разные интервалы времени локально облучали в той же дозе экранированные участки. Спустя 8 сут после второй экспоцизии извлекали селезенки и подсчитывали количество колоний. Оказалось, что увеличение числа колоний в селезенке есть функция времени между облучениями, функция числа мигрирующих за это время стволовых клеток. Подсчитано, что в течение суток из костного мозга одной конечности мыши мигрирует почти 100 КОЕ (1,4% из расчета на все КОЕ экранированного костного мозга).

Таким образом, полученные результаты демонстрируют активную рециркуляцию стволовых клеток. Эти данные согласуются с результатами опытов Хенкса (Hanks G. Е., 1964), который наблюдал линейный выход из экранированного при облучении костного мозга. Эксперименты (Петров Р. В., Хаитов Р. М., 1972), в которых миграция КОЕ прослежена в течение суток, демонстрируют, что темп выселения КОЕ из экранированного костного мозга голени не снижается по крайней мере в течение 24 ч после облучения.

Таблица 22. Миграция стволовых клеток из экранированного при облучении (800 Р) костного мозга у адреналэктомированных и контрольных мышей
Экранированный участок задней конечности Животные Сутки после операции Число колоний в селезенке
До коленного сустава Интактные-19,5 ± 1,2(18)
ЛО218,9 ± 2,1(14)
АЭ2> 30(16)
АЭ7> 30(8)
Интактные-6,3 ± 0,6(23)
ЛО27,0 ± 0,8(20)
АЭ221,5(2)
До 1/2 голени  > 30(5)
ЛО77,4 ± 1,3(15)
АЭ725,4 ± 2,4(5)
  > 30(12)
Стопа Интактные-3,5 ± 0,8(12)
АЭ226(1)
  > 30(2)
Примечание. В скобках - число мышей; ЛО - ложная операция; АЭ - адренал- эктомированные животные; > 30 - сливной рост колоний.

Рециркуляция стволовых клеток через кровь является важным процессом, обеспечивающим интеграцию в миелолимфоидной системе. Однако механизмы, регулирующие миграцию стволовых клеток, не были исследованы. В последние годы коллективом исследователей (Р.В. Петров, Р.М. Хаитов, Б.Б. Мороз, Г.И. Безин и др.) были получены экспериментальные материалы, свидетельствующие об участии кортикостероидных гормонов в регуляции миграции и рециркуляции стволовых клеток. Р.М. Хаитов и соавт. (1974), R.М. Khaitov и соавт. (1975) исследовали влияние гипокортикоидного состояния, вызываемого адреналэктомией, на миграцию стволовых клеток. В табл. 22 представлены результаты экспериментов по изучению влияния двусторонней адреналэктомии на миграцию кроветворных стволовых клеток из костного мозга. Ложная операция не влияет на интенсивность расселения стволовых клеток из экранированного участка костного мозга. Адреналэктомия, проведенная за 2-7 сут до исследования, приводит к резкому усилению миграции стволовых клеток из костного мозга, при этом эффект усиления миграции стволовых клеток у адреналэктомированных мышей не зависит от объема экранированного костного мозга - источника расселяющихся стволовых клеток. Более чем четырехкратное увеличение выхода стволовых клеток получено у адреналэктомированных мышей, которым экраниравили заднюю конечность до уровня 1/2 голени или только стопу (см. табл. 22).

Таким образом, выключение функции надпочечников сопровождается резким усилением выброса в циркуляцию стволовых клеток из костного мозга. Увеличение числа эндогенных колоний в селезенке летально облученных животных при экранировании участка костного мозга под влиянием тех или иных факторов может происходить или в результате усиления непосредственно миграции стволовых клеток из костного мозга, или же за счет стимуляции размножения репопулирующих в селезенку стволовых клеток, или вследствие местных изменений в селезенке, способствующих лучшему оседанию в ней стволовых клеток.

Для проверки этих предположений был проведен эксперимент с введением экзогенных стволовых клеток адреналэктомированным реципиентам. Через 7 сут после адреналэктомии мышей облучали γ-лучами в летальной дозе (850 Р) и трансплантировали им клетки костного мозга от интактных сингенных доноров. Адреналэктомия не влияла на репопуляцию селезенки экзогенными стволовыми клетками и не приводила к стимуляции их размножения. В периферической крови интактных мышей обнаруживается 6,6-9,7 стволовой клетки в расчете на 106 лейкоцитов, или 24,6-30,3 стволовой клетки в 1 мл. У адреналэктомированных мышей наблюдается более чем двухкратное увеличение количества циркулирующих стволовых клеток в расчете как на 106 лейкоцитов, так и на 1 мл крови на все сроки исследования, т. е. происходит повышенное выселение кроветворных стволовых клеток из костного мозга. В связи с этим возник вопрос, изменяются ли процессы рециркуляции стволовых клеток при повышенных концентрациях эндогенных кортикоидов.

Г.И. Безин и соавт. (1975) исследовали миграцию стволовых клеток в условиях гиперкортицизма, вызванного введением АКТГ. Различную степень гиперкортикоидного состояния индуцировали повторными подкожными инъекциями АКТГ пролонгированного действия в разных дозах. Уже через 2 ч после облучения в дозе 800 Р и инъекций АКТГ содержание 11-оксикортикостероидов (11-ОКС) в плазме повышалось до 82,9 мкг%, т. е. в 10 раз (нормальный уровень 11-ОКС у интактных мышей равен 8,3 мкг%), оставаясь примерно на этом же уровне в течение последующих 6 ч. Через 24 ч после облучения и введения АКТГ (к моменту повторной инъекции препарата в дозе 1,5 ед.) концентрация 11-ОКС была ниже нормального уровня. После второго введения АКТГ наблюдалась аналогичная динамика изменения уровня 11-ОКС, но степень увеличения концентрации кортикоидов была примерно в 2-2,5 раза меньше, чем после первой инъекции гормона. У облученных контрольных животных через 2 ч после облучения уровень 11-ОКС повышался до 30 мкг%, через 5 ч и в последующие сроки наблюдения величина этого показателя оставалась на субнормальном уровне.

Таблица 23. Уровень миграции стволовых клеток из костного мозга в условиях гиперкортицизма (число эндогенных колоний в селезенке)
850 Р + экран до 1/2 голени 850 Р тотально (контроль облучения)
+ изотонический раствор хлорида натрия 0,5 мл (контроль экранирования) + АКТГ
доза АКТГ, ед. 2 инъекции сразу и через 24 ч после облучения 1 инъекция сразу после облучения
25,9 ± 1,3 (20)1,512,6 ± 0,7 (28) 13,2 ± 1,2 (18)0,7 ± 0,1 (10)
22,6 ± 1,9 (18)1,010,3 ± 0,9 (17)9,7 ± 1,1 (16)1,1 ± 0,3 (13)
Примечание. В скобках - число животных.

Оказалось, что на фоне гиперкортицизма происходит значительное торможение миграции стволовых клеток (табл. 23). Однократное введение АКТ (1,5 ед.) сразу после облучения вызывает практически такое же угнетение миграции стволовых клеток, как и при двух инъекциях в той же дозе. Следовательно, повышение активности коры подпочечников, сопровождающееся резким увеличением содержания кортикостероидов в крови, приводит к ингибированию миграции кроветворных стволовых клеток. Однако уменьшение количества колоний в селезенке мышей, которым ввели АКТГ, может быть следствием не только угнетения процесса миграции, но и цитостатического действия высоких концентраций эндогенных глюкокортикоидов.

В связи с высказанным предположением было изучено влияние АКТГ на эндогенное колониеобразование в селезенке сублетально облученных животных (Безин Г. И. и др., 1975). Мышей облучали в дозе 600 P и двукратно вводили им АКТГ в дозе 1,5 ед. на мышь. Введение АКТГ сублетально облученным мышам не угнетало размножения эндогенных стволовых клеток. Отсутствие цитотоксического действия использованных доз АКТГ окончательно доказано в опытах с экзогенным клонированием стволовых клеток. Клетки костного мозга вводили летально облученным реципиентам через 2 ч после введения АКТГ (1,5 ед. на мышь), т. е. на фоне высоких концентраций кортикоидов в плазме крови. Через 20 ч после трансплантации костного мозга производили вторую инъекцию АКТГ в той же дозе. Количество экзогенных колоний в селезенке реципиентов, обработанных АКТГ, не изменялось.

В последующей работе была выявлена зависимость между уровнем кортикоидов в плазме и количеством стволовых клеток, циркулирующих в периферической крови. При изучении динамики циркуляции КОЕ в периферической крови интактных (необлученных) животных после однократного подкожного введения АКТГ пролонгированного действия в дозе 1,5 ед. на мышь установлено, что через 2-8 ч после введения АКТГ значительно повышался уровень 11-ОКС в плазме крови. В эти же сроки резко уменьшалось количество циркулирующих КОЕ. Через 24 ч после инъекции АКТГ при субнормальном уровне 11-ОКС содержание КОЕ в крови возвращалось к исходной величине.

Изложенные выше материалы были получены в условиях высоких концентраций эндогенных кортикоидов, создаваемых введением АКТГ пролонгированного действия. В то же время, как хорошо известно, кратковременная активация коры надпочечников закономерно возникает при действии на организм различных стресс-факторов. Возник вопрос, влияет ли такая реакция на процессы рециркуляции КОЕ? В этой связи исследовали динамику циркуляции КОЕ и концентрации 11-ОКС в плазме крови интактных (необлученных) животных после внутрибрюшшшого введения АКТГ в дозе 1,6 ед. на мышь (АКТГ острого действия). Через 30 мин, 1 и 2 ч после инъекции АКТГ наблюдалось повышение уровня кортикоидов в плазме крови и уменьшение количества циркулирующих КОЕ. Через 4 ч, когда концентрация гормона возвращалась к исходным величинам, восстанавливалось до нормы и содержание КОЕ в периферической крови (Moroz В.В. et al., 1975). В следующей серии экспериментов исследовали влияние разных доз АКТГ (0,05-1,6 ед. на мышь) на уровень циркулирующих КОЕ через 30 мин после инъекции гормона. Достоверное снижение содержания КОЕ в циркулирующей крови наблюдалось, когда концентрация 11-ОКС в плазме крови составляла 35,8±2,2 мкг% при средних значениях в норме 14,4±1,6 мкг%. При этом количество КОЕ составляло 60% исходной величины. Следовательно, увеличение содержания эндогенных кортикоидов в крови, сопоставимое по величине и длительности с таковыми при обычной стресс-реакции (опыты с АКТГ острого действия), сопровождается закономерным уменьшением количества циркулирующих стволовых клеток.

Таким образом, стимуляция функции коры надпочечников приводит к торможению миграции стволовых клеток из костного мозга. Действие АКТГ на миграцию стволовых клеток опосредуется через повышение концентрации в крови эндогенных глюкокортикоидов, так как аналогичные результаты получены при введении экзогенного гидрокортизона (Петров Р. В. и др., 1975).

Хорошо известно наличие суточной периодичности поступления в кровь гормонов коры надпочечников у грызунов (мышей и крыс) с максимумом секреции в вечерние и минимум в утренние часы. Оказалось, что концентрация циркулирующих стволовых клеток также подвержена циклическим (суточному ритму) изменениям. В крови концентрация стволовых клеток в несколько раз больше утром, чем после полудня. Следовательно, суточный ритм поступления в циркуляцию стволовых клеток находится в обратной зависимости от суточной периодичности выброса в кровь кортикостероидов. Интересно, что у мышей линий СВА и C57BL, оппозитных по уровню кортикостерона в плазме крови, отмечается обратная корреляция между интенсивностью миграции стволовых клеток и количеством их в норме в периферической крови, с одной стороны, и концентрацией 11-ОКС в крови - с другой. Эти факты также свидетельствуют о тесной связи между уровнем кортикостероидов в крови и интенсивностью рециркуляции стволовых клеток.

Суммируя данные об эффектах гипо- и гиперкортицизма, можно сделать заключение, что процессы миграции и рециркуляции КОЕ в организме находятся под гормональным контролем и зависят от глюкокортикоидной функции надпочечников. По-видимому, физиологические концентрации глюкокортикоидов оказывают сдерживающее влияние на миграцию КОЕ. Уменьшение содержания циркулирующих КОЕ возникает лишь при определенной степени повышения концентрации кортикоидов в плазме крови. Это вполне сопоставимо по размерам с подъемом уровня кортикоидов, который наблюдается после достаточно интенсивного воздействия на организм различных стресс-агентов.

Взаимодействие Т- и В-клеток, инициирующее иммунный ответ

В конце 60-х годов было установлено, что в выработке антител принимают участие клетки как кроветворной, так и лимфоидной системы (Claman Н. N. et al., 1966). Наиболее четко подобные доказательства представлены J. F. А. P. Miller, G. F. Mitchel (1968), G. J. V. Nossal и соавт. (1968). У мышей неонатальная тимэктомия снижает иммунный ответ против гетерологичных антигенов. Иммунореактивность тимэктомированных мышей легко восстанавливается при введении тимоцитов или лимфоцитов грудного протока, но не клеток костного мозга, причем иммунный ответ к эритроцитам барана у тимэктомированных мышей по своей величине приближается к ответу интактных мышей и не зависит от того, вводятся ли сингенные или полусингенные клетки вилочковой железы. Последнее обстоятельство позволило провести с помощью изоантисывороток анализ происхождения АОК. Оказалось, что почти все антителопродуценты происходят из клеток костного мозга. При введении летально облученным реципиентам смеси клеток костного мозга и вилочковой железы (или грудного протока) с эритроцитами барана, которые сами по себе в отдельности неактивны в выработке антител, происходит синергическое накопление АОК в селезенках реципиентов. Следует отметить, что в этом случае взаимодействие клеток костного мозга и вилочковой железы реализовалось при условии сингении клеток. Анализ с применением хромосомного маркера Т6Т6 окончательно доказал, что основная масса АОК происходит из предшественников костного мозга. Кооперирующие клетки костного мозга и вилочковой железы впоследствии получили название В-и Т-клеток соответственно.

При индукции реакции "трансплантат против хозяина" родительскими клетками у новорожденных гибридов F1 синергический эффект наблюдается между клетками вилочковой железы и лимфатических узлов, а также (хотя и менее слабый) тимуса и селезенки (Cantor Н., Asofsky R., 1970). Предполагается, что в реакциях клеточного иммунитета взаимодействие происходит не между В- и Т-клетками, а между самими Т-клетками. Отсюда делается вывод, что среди Т-клеток следует различать T1- и Т1-клетки, из которых первые накапливаются преимущественно в селезенке и неспособны к циркуляции, а вторые - в лимфатических узлах и активно рециркулируют. Считается, что T1-клетки являются короткоживущими лимфоцитами, а Т2-клетки - долгоживущими.

Более прямое доказательство существования T1- и Т2-клеток получено из дальнейших работ Н. Cantor. Обработка клеток лимфатических узлов слабыми концентрациями анти-Θ-сыворотки (в разведении 1:16) полностью отменяла их способность индуцировать реакцию "трансплантат против хозяина". Однако, если эти обработанные клетки лимфатических узлов смешивали с нормальными клетками вилочковой железы и смесь вводили новорожденным гибридам F1, отмечался такой же синергический эффект в индукции реакции "трансплантат против хозяина", как и при использовании смеси нормальных клеток лимфатических узлов и тимуса.

  • Роль макрофагов во взаимодействии Т- и В-клеток [показать]
  • Механизмы кооперации Т- и В-клеток [показать]

Взаимодействие Т- и В-лимфоцитов, угнетающее иммунный ответ

Тимусзависимые лимфоциты играют регуляторную роль в иммунном ответе. Они осуществляют позитивную регуляцию (т. е. усиливают ответ) при вспомогательном (хелперном) взаимодействии с В-клетками (Т-В-кооперация) или с Т-клетками, предшественниками эффекторов клеточных реакций, и негативную регуляцию (т. е. угнетают ответ) путем супрессивного влияния на ответ как В-, так и Т-клеток к антигену. Путь введения антигена, его физико-химическая форма, доза, присутствие или отсутствие адъюванта, генотип животного имеют значение для развития хелперных и супрессорных Т-клеток.

  • Антигенспецифические Т-супрессоры [показать]
  • Антигеннеспецифические Т-супрессоры [показать]
  • Подавление аллотипа Т-супрессорами [показать]
  • Подавление Т-супрессорами идиотипа [показать]
  • Маркеры и распределение Т-клеток-супрессоров в лимфоидных органах [показать]
  • Механизм действия Т-супрессоров [показать]
  • Генетический контроль Т-супрессоров [показать]

В-супрессоры

В настоящее время становится ясным, что на различные формы иммунного ответа оказывает супрессивное действие несколько различных систем, опосредующих свое действие через различные клетки (Т-клетки, В-клетки, макрофаги).

Р. В. Петровым и соавт. (1976) выявлена неспецифическая и антигеноспецифическая супрессия гуморального иммунного ответа клетками костномозгового происхождения. В первых опытах этой серии исследований мышам линий СВА и C57BL, соответственно высоко- или низкоотвечающим на эритроциты барана, вводили внутривенно сингенные клетки лимфатических узлов, селезенки, костного мозга или вилочковой железы интактных доноров: вместе с эритроцитами барана и определяли продукцию АОК в селезенке. Оказалось, что трансплантация клеток лимфатических узлов, костного мозга или вилочковой железы мышам линии C57BL, генетически низкореагирующим на эритроциты барана, значительно повышает их иммунный ответ. Напротив, перенос клеток лимфатических узлов или костного мозга, но не тимоцитов мышам линии СВА, генетически высокореагирующим на данный антиген, приводит к значительной супрессии иммунного ответа. Обработка доноров лимфатических узлов или селезенки циклофосфамидом в дозе, избирательно элиминирующей только В-клетки отменяет эффект супрессии.

Перенос мышам линии СВА клеток селезенки, полученных через 7 дней после иммунизации доноров, приводит к значительно большей супрессии иммунного ответа, чем перенос интактных клеток селезенки. Эффект специфичен, так как клетки селезенки доноров, иммунизированных посторонними антигенами, оказывали такое же супрессивное действие, как и клетки интактных доноров. Более выраженная супрессия иммунного ответа, наблюдаемая при введении иммунных клеток селезенки, по сравнению с интактными спленоцитамп, очевидно, происходит за счет большего содержания В-клеток супрессоров в лимфоидных органах после пика ответа, поскольку, начиная с этого времени, продукция АОК резко снижается. В дальнейших исследованиях (Petrov P. V., Khaitov R. М., 1977) было установлено, что перенос сингенных гидрокортизонорезистентных тимоцитов и активированных антигеном Т-клеток (клетки селезенки летально облученных мышей, инъецированных тимоцитами и эритроцитами барана) не приводит к супрессии иммунного ответа. Напротив, перенос популяции В-клеток успешно супрессирует иммунный ответ. Введение большой дозы В-клеток (107 клеток селезенки тимэктомированных летально облученных и восстановленных костным мозгом мышей) супрессирует иммунный ответ и у низкореагирующей линии мышей C57BL. В отличие от использованных доз клеток костного мозга и лимфатических узлов эта клеточная суспензия содержит значительно больше В-клеток, но практически не содержит Т-клеток.

Хотя на различных экспериментальных моделях in vitro было показано, что клетки костного мозга продуцируют факторы, стимулирующие антителогенез (Михайлова А. А. и др., 1971), оказалось, что непосредственное добавление клеток костного мозга в культуры in vitro лимфоидных клеток подавляет продукцию антител к различным антигенам (Петров Р. В. и др., 1977; Duwe А. К., Siughal S. К., 1976). Взятые вместе, эти данные позволяют говорить о регуляторной роли костно-мозговых клеток в антителогенезе.

В этой связи представляет большой интерес диссоциация стимулирующего и супрессирующего эффектов костного мозга (Петров Р. В. и др., 1977; Атауллаханов Р. П., 1978). Авторы культивировали в двухкамерных флаконах in vitro клетки селезенки и костного мозга в смеси или разделенными миллипоровой мембраной. Во все культуры добавляли эритроциты барана. Оказалось, что реализация костным мозгом гуморального фактора, стимулирующего продукцию антител, не требует прямого контакта между клетками костного мозга и селезенки. Гуморальный фактор костного мозга, супрессирующий продукцию антител, вырабатывается в результате прямого контакта клеток костного мозга с активно пролиферирующими атигенстимулированными лимфоцитами селезенки. Схема основных экспериментов представлена на рис. 59. Совместное культивирование сингенных клеток костного мозга и селезенки мышей СВА, разделенных миллипоровой мембраной, приводит к стимуляции образования антителопродуцентов и усилению включения 3Н-тимидина клетками селезенки. Однако в случае культивирования в нижней камере смеси клеток селезенки и костного мозга происходит резкое подавление антителогенеза и пролиферации клеток селезенки, содержащихся в верхней камере.

Важен тот факт, что в смешанпых культурах клеток костного мозга и селезенки, несмотря на практически полное подавление образования антителопродуцентов, имеет место активная клеточная пролиферация. Особенно интенсивно включается 3Н-тимидин в культурах, содержащих только клетки селезенки или смесь клеток костного мозга и селезенки. В монокультурах клеток костного мозга включение метки идет менее интенсивно. Дискриминативный анализ пролиферирующих клеток в смешанных культурах, состоящих из равных количеств клеток костного мозга и селезенки, проведенный с использованием хромосомного маркера Т6Т6, показал, что в первые 2 сут культивирования митотическая активность клеток костного мозга и клеток селезенки в смешанных культурах примерно одинакова. Однако через 3 сут после начала культивирования в смешанной культуре почти 80% делящихся клеток были костномозговыми. На 4-е сутки инкубации практически все делящиеся клетки в смешанной культуре были костно-мозгового происхождения. Таким образом, к концу инкубации в смешанных культурах полностью прекращается митотическая активность селезеночных клеток при сильной активации пролиферации костно-мозговых клеток.

Возникает вопрос, какие клетки костного мозга являются супрессорами. Показано, что супрессивное действие костного мозга на антителогенез связано с наличием в популяции костно-мозговых клеток неприлипающих средних лимфоцитов, резистентных к действию антн-Θ- и антимакрофагальной сывороток, но чувствительных к обработке антииммуноглобулиновой сывороткой (Duwe А. К., Singhel S. К., 1976). В наших опытах для определения природы костно-мозговых супрессоров клетки костного мозга инкубировали с антисыворотками против MBLA или против иммуноглобулинов и комплементов (Петров Р. В. и др., 1978). Установлено, что обработка костного мозга этими антисыворотками, обладающими специфической цитотоксичностью по отношению к В-лимфоцитам, значительно снижает супрессивную активность клеток костного мозга. Таким образом, костномозговыми супрессорами являются клетки с поверхностными маркерами В-лимфоцитов.

Обнаружено, что введение мышам оксимочевины в концентрации, приводящей к избирательному цитолизу активнопролиферирующих клеток в костном мозге, сопровождается полной отменой супрессивного эффекта костномозговых клеток (Петров Р. В. и др., 1978). Иначе говоря, субпопуляция костномозговых клеток-супрессоров является активнопролиферирующей in situ. Изложенные выше данные позволили более точно охарактеризовать костномозговые супрессоры. В развитии В-лимфоцита можно выделить следующие основные стадии: стволовая клетка -> стволовая клетка лимфоидного ряда -> предшественник В-лимфоцитов делящаяся переходная клетка -> неделящаяся нулевая клетка -> неделящийся незрелый В1-лимфоцит -> неделящийся зрелый В2-лимфоцит. На наш взгляд, наиболее вероятным кандидатом на роль костномозговой клетки-супрессоры является предшественник В-лимфоцита. Именно эта клетка несет и поверхностные иммуноглобулины и активно пролиферирует.

S.I. Katz и соавт. (1974) показали существование В-лимфоцитов супрессоров клеточного иммунитета, которые стимулируются при нормальной иммунизации. Эти В-супрессоры влияют на эффекторное звено реакций ГЗТ и проявляют свое угнетающее действие в течение 1 ч после внутривенного введения.

Можно предполагать, что функциональная роль антигеноспецифических В-супрессоров сводится к гомеостатической регуляции иммунного ответа и к ограничению его величины. Биологическое значение костномозговых В-супрессоров, неспецифическп угнетающих антителогенез при прямом контакте с антигенстимулированными клетками селезенки, заключается, очевидно, в том, чтобы блокировать иммуногенез в костном мозге in situ.

Хорошо известно, что иммунизация приводит к продукции АОК в селезенке и в лимфоидных тканях, но не в костном мозге. Возможно, что именно костно-мозговые В-супрессоры призваны "запрещать" иммуногенез в костном мозге in situ. Таким образом, популяции регуляторных клеток составляют сложные клеточные коллективы, взаимодействие которых с другими лимфоидными клетками обеспечивает поддержание иммунологического гомеостаза.

Продолжение: Гормоны и медиаторы иммунной системы

К оглавлению

Литература [показать]




 
 

Куда пойти учиться



 

Виртуальные консультации

На нашем форуме вы можете задать вопросы о проблемах своего здоровья, получить поддержку и бесплатную профессиональную рекомендацию специалиста, найти новых знакомых и поговорить на волнующие вас темы. Это позволит вам сделать собственный выбор на основании полученных фактов.

Медицинский форум КОМПАС ЗДОРОВЬЯ

Обратите внимание! Диагностика и лечение виртуально не проводятся! Обсуждаются только возможные пути сохранения вашего здоровья.

Подробнее см. Правила форума  

Последние сообщения



Реальные консультации


Реальный консультативный прием ограничен.

Ранее обращавшиеся пациенты могут найти меня по известным им реквизитам.

Заметки на полях


навязывание услуг компании Билайн, воровство компании Билайн

Нажми на картинку -
узнай подробности!

Новости сайта

Ссылки на внешние страницы

20.05.12

Уважаемые пользователи!

Просьба сообщать о неработающих ссылках на внешние страницы, включая ссылки, не выводящие прямо на нужный материал, запрашивающие оплату, требующие личные данные и т.д. Для оперативности вы можете сделать это через форму отзыва, размещенную на каждой странице.
Ссылки будут заменены на рабочие или удалены.

Тема от 05.09.08 актуальна!

Остался неоцифрованным 3-й том МКБ. Желающие оказать помощь могут заявить об этом на нашем форуме

05.09.08
В настоящее время на сайте готовится полная HTML-версия МКБ-10 - Международной классификации болезней, 10-я редакция.

Желающие принять участие могут заявить об этом на нашем форуме

25.04.08
Уведомления об изменениях на сайте можно получить через раздел форума "Компас здоровья" - Библиотека сайта "Островок здоровья"

Островок здоровья

 
----
Чтобы сообщить об ошибке на данной странице, выделите текст мышью и нажмите Ctrl+Enter.
Выделенный текст будет отправлен редактору сайта.
----
 
Информация, представленная на данном сайте, предназначена исключительно для образовательных и научных целей,
не должна использоваться для самостоятельной диагностики и лечения, и не может служить заменой очной консультации врача.
Администрация сайта не несёт ответственности за результаты, полученные в ходе самолечения с использованием справочного материала сайта
Перепечатка материалов сайта разрешается при условии размещения активной ссылки на оригинальный материал.
© 2008 blizzard. Все права защищены и охраняются законом.



 
----